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      轉(zhuǎn)座法DNA建庫試劑盒 1h極速DNA建庫

      產(chǎn) 品 描 述

      Hieff NGS® Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina® 是針對lllumina®高通量測序平臺專業(yè)開發(fā)設(shè)計的轉(zhuǎn)座酶法建庫試劑盒。適用于1 ng/50 ng的基因組DNA、cDNA、擴增子(>500 bp)等樣本的建庫。與常規(guī)分步法建庫相比,僅需10 min即可完成DNA片段化、末端修復(fù)和接頭連接過程,顯著縮短建庫時間,并獲得優(yōu)異的測序質(zhì)量。

       

      產(chǎn) 品 原 理

      在Transposome Mix中包含由轉(zhuǎn)座酶和兩種等摩爾的接頭Adapter 1和Adapter 2構(gòu)成一個完整的轉(zhuǎn)座子。轉(zhuǎn)座發(fā)生時,該轉(zhuǎn)座子將Adapter 1和Adapter 2接頭序列插入靶基因中,形成一端帶有Adapter 1,一端帶有Adapter 2的DNA,之后利用DNA聚合酶將轉(zhuǎn)座形成的切口補齊。這種產(chǎn)物經(jīng)N5(N5XX)和N7(N7XX)以及P5和P7(PCR Primer Mix)兩對引物擴增,產(chǎn)物經(jīng)分選和純化后即為可測序文庫。

      轉(zhuǎn)座法DNA建庫原理

       

      產(chǎn) 品 特 點

      》》 操作簡便:一步法文庫構(gòu)建,一步完成片段化到接頭連接;

      》》 適用范圍廣:適用不同來源不同GC含量的DNA樣本;

      》》 極速建庫:單個文庫構(gòu)建僅90 min即可完成;

      》》 產(chǎn)品穩(wěn)定:嚴格的批次性能與穩(wěn)定質(zhì)控。

       

      產(chǎn) 品 優(yōu) 勢

      1)高效簡便

      本產(chǎn)品基于轉(zhuǎn)座酶法開發(fā),其核心原理是轉(zhuǎn)座酶及其轉(zhuǎn)座機制。產(chǎn)品整個操作流程僅包括片段化、擴增和純化過程,整體過程僅需 90分鐘,即可完成建庫。
       

      轉(zhuǎn)座酶法建庫步驟 

      2) 優(yōu)秀文庫質(zhì)量

      使用Hieff NGS®  Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina®對1 ng嗜鹽桿菌gDNA(65% GC)樣本建庫,并分別使用1.0×磁珠進行純化,0.8×/0.2×、0.7×/0.2×、0.5×/0.15×磁珠比例進行文庫分選,均獲得高質(zhì)量文庫。

      Agilent 2100文庫質(zhì)量分析 

      圖. Agilent 2100文庫質(zhì)量分析

      3)優(yōu)秀測序質(zhì)量

      使用Hieff NGS® Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina®對不同GC含量的微生物gDNA樣本建庫,并使用HiSeq 4000測序,結(jié)果顯示:無論樣本起始量及GC含量,Hieff NGS® Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina®所建文庫均獲得堿基質(zhì)量好且覆蓋度均一的測序數(shù)據(jù)。

       

      文庫測序數(shù)據(jù)

      文庫測序數(shù)據(jù)

       

      Input   DNA

      Species

      GC%

      Mapped   Reads%

      Coverage

      (%)

      Coverage depth (%)

      Quality(%)

      10   ×

      50   ×

      100   ×

      Q20

      Q30

      1   ng

      蠟狀芽孢桿菌

      34

      93.62

      99.64

      99.64

      99.63

      99.61

      97.90

      94.65

      大腸桿菌

      50

      99.01

      100

      99.99

      99.99

      99.99

      97.79

      94.22

      嗜鹽桿菌

      65

      94.20

      99.61

      98.58

      95.98

      93.47

      97.21

      92.59

      50   ng

      蠟狀芽孢桿菌

      34

      94.00

      99.64

      99.64

      99.63

      99.60

      98.13

      95.25

      大腸桿菌

      50

      99.05

      100

      99.99

      99.99

      99.99

      97.89

      94.40

      嗜鹽桿菌

      65

      93.81

      99.99

      99.94

      99.55

      98.77

      96.59

      91.68


       

      產(chǎn) 品 訂 購

      產(chǎn)品名稱

      貨號

      規(guī)格

      價格(元)

      Hieff NGS® Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina(for 1ng)

      12206ES08

      8 libraries

      1355

      12206ES24

      24 libraries

      6155

      12206ES96

      96 libraries

      23855

      Hieff NGS®Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina(for 50ng)

      12207ES08

      8 libraries

      咨詢

      12207ES24

      24 libraries

      12207ES96

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      類別

      產(chǎn)品名稱

      貨號

      規(guī)格

      價格(元)

      磁珠

      DNA分選

      Hieff NGS® DNA selection Beads

      12601ES56/75

      60 mL

      6286

      12601ES75

      450 mL

      26186

      定量

      Qubit

      dsDNA HS assay kit for Qubit®

      12640ES60/76

      100 T

      686

      12640ES76

      500 T

      2696

       

      400-6111-883