產(chǎn)品說明書
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產(chǎn)品簡介
Hieff Trans®293 Transfection Reagent轉(zhuǎn)染試劑是一種高性能陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑，適用于常見貼壁或懸浮的多種細(xì)胞的質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染，其中在293細(xì)胞上有更好的轉(zhuǎn)染效果，可用于懸浮或貼壁293細(xì)胞進(jìn)行蛋白表達(dá)及病毒包裝。Hieff Trans®293 Transfection Reagent轉(zhuǎn)染試劑經(jīng)過精心設(shè)計，結(jié)構(gòu)明確、分子量均一，可實現(xiàn)高效、高重復(fù)性的細(xì)胞轉(zhuǎn)染使其兼具高效的陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑/DNA復(fù)合物形成能力和轉(zhuǎn)染到細(xì)胞內(nèi)DNA的快速釋放能力，保證了優(yōu)異的轉(zhuǎn)染性能和極低的細(xì)胞毒性。
組分信息
|
組分名稱 |
40818ES01 |
40818ES03 |
40818ES10 |
40818ES60 |
|
Hieff Trans®293 Transfection Reagent |
100 μL |
1 mL |
10 mL |
100 mL |
儲存條件
2-8ºC保存，有效期2年。
使用說明
一、貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染操作流程（以6孔板貼壁培養(yǎng)HEK 293T為例）
1. 接種細(xì)胞
根據(jù)細(xì)胞狀態(tài)，選擇合適的接種密度，以轉(zhuǎn)染時細(xì)胞密度在70%~80%為宜。
2. 準(zhǔn)備DNA-轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物
1）質(zhì)粒與試劑比例：建議質(zhì)粒（μg）與試劑（μL）參考配比區(qū)間為1:0.5 - 1:3。
2）質(zhì)粒稀釋：使用50 μL無血清培養(yǎng)基稀釋2 μg質(zhì)粒，并輕輕混勻。
3）試劑稀釋：使用50 μL無血清培養(yǎng)基稀釋4 μL 轉(zhuǎn)染試劑，并輕輕混勻。
4）配置復(fù)合物：將配置好的轉(zhuǎn)染試劑稀釋液加入到質(zhì)粒稀釋液中，輕輕渦旋混勻后，室溫靜置10-20 mins，備用。
3. 轉(zhuǎn)染細(xì)胞
1）直接將配置好的DNA-轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物加入到細(xì)胞培養(yǎng)板的每個孔中，搖動培養(yǎng)板，輕輕混勻。
2）在37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24-72h后進(jìn)行檢測分析。
不同細(xì)胞培養(yǎng)容器轉(zhuǎn)染用量（僅供參考）：
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培養(yǎng)容器 |
表面積（cm2） |
DNA稀釋 |
轉(zhuǎn)染試劑稀釋 |
培養(yǎng)基 總量 |
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|
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DNA量（μg） |
稀釋液體積（μL） |
轉(zhuǎn)染試劑量（μL） |
稀釋液體積（μL） |
|
|
96孔板 |
0.3 |
0.1 |
5 |
0.2 |
5 |
100 μL |
|
48孔板 |
0.7 |
0.2 |
10 |
0.4 |
10 |
200 μL |
|
24孔板 |
1.9 |
0.5 |
25 |
1 |
25 |
500 μL |
|
12孔板 |
3.8 |
1 |
25 |
2 |
25 |
1 mL |
|
6孔板 |
10 |
2 |
50 |
4 |
50 |
2 mL |
|
25 cm2培養(yǎng)瓶 |
21 |
4 |
100 |
8 |
100 |
4 mL |
|
75 cm2培養(yǎng)瓶 |
58 |
8 |
250 |
16 |
250 |
10 mL |
|
10 cm培養(yǎng)皿 |
60 |
8 |
250 |
16 |
250 |
10 mL |
二、懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染操作流程（1L體系為例）
1. 接種細(xì)胞
根據(jù)細(xì)胞狀態(tài)，選擇合適的接種密度，建議細(xì)胞接種密度為1-1.5×106 cells/mL，使第二天轉(zhuǎn)染時細(xì)胞密度為2-3×106 cells/mL為宜。。
2. 準(zhǔn)備DNA-轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物
1）質(zhì)粒與試劑比例：建議質(zhì)粒（μg）與試劑（μL）參考配比區(qū)間為1:0.5 - 1:3。
2）質(zhì)粒稀釋：使用50 mL無血清培養(yǎng)基稀釋2 mg質(zhì)粒，并輕輕混勻。
3）試劑稀釋：使用50 mL無血清培養(yǎng)基稀釋4 mL 轉(zhuǎn)染試劑，并輕輕混勻。
4）配置復(fù)合物：將配置好的轉(zhuǎn)染試劑稀釋液加入到質(zhì)粒稀釋液中，輕輕渦旋混勻后，室溫靜置10-20 mins，備用。
3. 轉(zhuǎn)染細(xì)胞
1）直接將配置好的DNA-轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物加入到1L細(xì)胞懸液中，搖動培養(yǎng)瓶，輕輕混勻。
2）在37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24-72h后進(jìn)行檢測分析。
注意事項
1. 本產(chǎn)品僅作科研用途。
2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
Ver.CN20241012
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