核心賣點(diǎn)

 

5 min超快速磁珠法甲基化轉(zhuǎn)化 助力腫瘤早篩和表觀遺傳學(xué)研究

 

產(chǎn)品應(yīng)用

 

BS轉(zhuǎn)化  腫瘤早篩  表觀遺傳研究  轉(zhuǎn)化后的產(chǎn)物適用于PCR擴(kuò)增和NGS測(cè)序等下游應(yīng)用。

 

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

 

轉(zhuǎn)化速度快：轉(zhuǎn)化時(shí)間縮短至5 min。

轉(zhuǎn)化效率高：未甲基化的胞嘧啶轉(zhuǎn)化率≥99.5%。

操作簡(jiǎn)便：轉(zhuǎn)化試劑無(wú)需配制，簡(jiǎn)單方便；兼容自動(dòng)化提取儀。

 

產(chǎn)品描述

 

Hieff® Mag Superfast DNA Methylation Bisulfite Kit超快速DNA亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化試劑盒（磁珠法）可以快速地將DNA樣品中的未甲基化胞嘧啶轉(zhuǎn)化成尿嘧啶而甲基化胞嘧啶維持不變，雙鏈DNA經(jīng)過(guò)高溫亞硫酸氫鹽處理后，雙鏈DNA解鏈變成單鏈，在HSO3-作用下，導(dǎo)致胞嘧啶殘基發(fā)生脫氨基反應(yīng)并將它們轉(zhuǎn)化為尿嘧啶，甲基化修飾的殘基保持不變。進(jìn)而在后續(xù)PCR擴(kuò)增過(guò)程中，尿嘧啶會(huì)被胸腺嘧啶(T)取代。DNA投入量范圍100 pg-2 μg; 未甲基化的胞嘧啶轉(zhuǎn)化效率≥99%。轉(zhuǎn)化后的產(chǎn)物適用于PCR擴(kuò)增和NGS測(cè)序等下游應(yīng)用。

 

組分信息

 

組分編號(hào)	組分名稱	12227ES10	12227ES50
12227-A	轉(zhuǎn)化液	1.0 mL/管×2	1.5 mL/管×7
12227-B	結(jié)合液	6.5 mL/瓶×1	32 mL/瓶×1
12227-C	脫硫液	2.2 mL/瓶×1	12 mL/瓶×1
12227-D	洗滌液	2.5 mL/瓶×1	12.5 mL/瓶×1
12227-E	洗脫液	1 mL/管×1	5 mL/瓶×1
12227-F	磁珠懸浮液	0.12 mL/管×1	0.6 mL/管×1

【注】：10T：使用前洗滌液（12227-D）每瓶需加入10 mL無(wú)水乙醇；

50T：使用前洗滌液（12227-D）每瓶需加入50 mL無(wú)水乙醇；

加入無(wú)水乙醇后，顛倒混勻后備用，此時(shí)應(yīng)將瓶蓋擰緊，防止乙醇揮發(fā)影響試劑使用效果。

 

存儲(chǔ)條件

12227-A轉(zhuǎn)化液室溫避光保存，其他組分室溫保存，有效期1年。

【注】：12227-A存放溫度盡量不要超過(guò)25℃，溫度太高會(huì)導(dǎo)致晶體析出。

 

競(jìng)品對(duì)比

 

產(chǎn)品亮點(diǎn)1-優(yōu)異的轉(zhuǎn)化率

投入不用量的293gDNA，293gDNA參入0.5% λ DNA，使用12227（磁珠法）與競(jìng)品1轉(zhuǎn)化試劑盒進(jìn)行頭對(duì)頭對(duì)比，同時(shí)采用雙鏈甲基化DNA建庫(kù)（12214ES），如圖4所示：12227（磁珠法）對(duì)不同投入量的DNA中 λ DNA C的轉(zhuǎn)化率≥99.5%，轉(zhuǎn)化時(shí)間適當(dāng)延長(zhǎng)，能進(jìn)一步提高轉(zhuǎn)化效率。

圖4 12227和競(jìng)品的轉(zhuǎn)化率

 

產(chǎn)品亮點(diǎn)2-優(yōu)異的樣本兼容率

10 ng cf DNA和50 ng FFPE DNA，cf DNA和FFPE DNA都參入0.5% λ DNA，使用12227（磁珠法）與競(jìng)品1轉(zhuǎn)化試劑盒進(jìn)行頭對(duì)頭對(duì)比，同時(shí)采用雙鏈甲基化DNA建庫(kù)（12214ES），如圖5所示：12227（磁珠法）對(duì)不同樣本中 λ DNA C的轉(zhuǎn)化率≥99.5%，轉(zhuǎn)化時(shí)間適當(dāng)延長(zhǎng)，能進(jìn)一步提高轉(zhuǎn)化效率。

產(chǎn)品亮點(diǎn)3-優(yōu)異的回收率

投入不同量的293 DNA，使用12225和12227與競(jìng)品1轉(zhuǎn)化試劑盒進(jìn)行頭對(duì)頭對(duì)比，轉(zhuǎn)化后采用Qubit ssDNA定量，計(jì)算回收率，如圖6所示：12225的樣本回收率能穩(wěn)定達(dá)到60%以上，并且當(dāng)樣本量大于200 ng，回收率能超過(guò)70%，磁珠法轉(zhuǎn)化試劑在高投入量下，回收率略低于柱式法，1 μg以內(nèi)，磁珠法的回收率能達(dá)到60%。

備注：競(jìng)品1為磁珠法

 

 

Ver.CN20241015