產(chǎn)品描述
RTGreen是一種與SYBR Green I具有相似光譜特性的DNA結(jié)合染料，獨特的工作特性使其不僅可用于熒光定量PCR（qPCR），而且可用于高分辨率溶解曲線（HRM）分析。相比較于SYBR Green I，優(yōu)勢主要表現(xiàn)在以下三個方面：

1）RTGreen對PCR 抑制性遠(yuǎn)小于SYBR Green I
智能化的“按要求釋放”DNA 結(jié)合技術(shù)賦予RTGreen對PCR的低抑制性。正因如此，PCR實驗中可使用高濃度的RTGreen從而獲得大大增強(qiáng)的擴(kuò)增信號。高濃度的RTGreen消除了“染料重分布”的缺陷，使其既可用于多重PCR，也可用于HRM分析。

2）RTGreen的穩(wěn)定性極強(qiáng)
在正常的儲存、操作和PCR過程中不會被破壞。在緩沖溶液中的染料可以安全的儲存在室溫或冰箱里，也可以反復(fù)凍融。然而SYBR Green I很不穩(wěn)定而且降解后對PCR 抑制性更強(qiáng)。

3）RTGreen降低細(xì)胞膜通透性，操作更加安全
細(xì)胞膜穿透性測試表明，RTGreen 幾乎不能穿透細(xì)胞膜，安全性高。RTGreen 既沒有誘變性也沒有細(xì)胞毒性。相反，雖然 SYBR Green I 本身誘變性很弱，但它在細(xì)胞中可能抑制了正常DNA 的修復(fù)機(jī)制，使其有誘變增強(qiáng)作用。
另外，RTGreen具有優(yōu)越的兼容性，能夠和各知名品牌的qPCR儀器兼容。用RTGreen替代SYBR Green I，無需改變?nèi)魏文壳笆褂玫牟僮鞑襟E和儀器設(shè)備，非常方便。

運輸與保存方法

冰袋運輸。4℃干燥避光保存。保質(zhì)期12個月。

注意事項
1）為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
2）本產(chǎn)品僅作科研用途！

 

操作步驟（亦可使用實驗室常用的SYBR Green I qPCR操作流程）

1.參照下表配制qPCR反應(yīng)體系（50 μL）

組分	使用量
10×polymerase buffer without magnesium	5 μL
50 mM MgCl2	2.5 μL
2 mM dNTP	5 μL
20× RTGreen	2.5 μL
Taq DNA polymerase	1-5 U
each of primers (final concentrations)	0.1-1 μM
ddH2O	Up to 50 μL

【注】：

1）使用RTGreen染料進(jìn)行qPCR反應(yīng)的Mg2+最佳推薦濃度是2.5 mM。

2）使用Hotstart Taq DNA polymerase可以得到更理想的擴(kuò)增效果，但需要根據(jù)經(jīng)驗調(diào)整工作體系。

2.熱循環(huán)熒光檢測儀內(nèi)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，并在退火或延伸步驟實時記錄熒光信號。

相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品名稱	貨號	規(guī)格
Goldview核酸染料（10,000×）	10201ES03	1 mL
YeaRed 核酸染料（10,000× 水溶液）HOT	10202ES76	500 μL
YeaGreen核酸染料（10,000× 水溶液）	10204ES76	500 μL
Agarose瓊脂糖HOT	10208ES60/76	100/500 g
Low Melting Point Agarose 低熔點瓊脂糖	10214ES08/25	5/25 g
2000 DNA Marker HOT	10501ES60/80	100/1000 T

HB210824