產(chǎn)品說明書
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產(chǎn)品簡介
低熔點(diǎn)瓊脂糖（Low melting point agarose）是經(jīng)過改良使得成膠溫度和熔點(diǎn)更低的瓊脂糖，相比于常規(guī)瓊脂糖，分子篩特性更好，條帶清晰度更高。非常適用于分子量大于1000 bp核酸的分離以及電泳后核酸片段的回收（因其約在65.5°C熔化，幾乎低于所有核酸分子的熔點(diǎn)）。低熔點(diǎn)瓊脂糖凝膠電泳純化回收的DNA膠條重熔后，可以直接用于制備放射性同位素標(biāo)記的DNA探針。限制性酶切核酸片段經(jīng)低熔點(diǎn)瓊脂糖凝膠電泳分離后，切膠回收的核酸膠條重熔后也可以非常方便的直接克隆到質(zhì)粒中。本品也適用于組織培養(yǎng)細(xì)胞的克隆和病毒空斑實(shí)驗(yàn)。
瓊脂糖的基本參數(shù)，包括：
1）硫酸鹽含量（sulfate content）——純度指標(biāo)，因?yàn)榱蛩岣谴嬖诃傊莾?nèi)的主要離子基團(tuán)；
2）凝膠強(qiáng)度（gel strength）——施加于凝膠使之?dāng)嗔训耐饬Γ?/font>
3）膠凝點(diǎn)（Gel point）——水溶性瓊脂糖溶液冷卻后形成凝膠時(shí)的溫度。液體向凝膠轉(zhuǎn)化的過程中，瓊脂糖溶液具有滯后性，因此，膠凝點(diǎn)不等同于膠熔點(diǎn)；
4）電滲（EEO）——液體穿透凝膠的一種電動運(yùn)動。瓊脂糖凝膠內(nèi)的陰離子基團(tuán)吸附在基質(zhì)上不會發(fā)生遷移，但是解離的陽離子就會朝負(fù)極遷移，從而產(chǎn)生電滲。由于生物聚合物的電泳遷移通常是朝負(fù)極運(yùn)動，則EEO產(chǎn)生的內(nèi)部對流會干擾分離效率。
儲存條件
室溫保存，有效期5年。
產(chǎn)品性質(zhì)
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CAS號（CAS NO.） |
39346-81-1 |
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外觀（Appearance） |
白色至類白色粉末 |
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凝膠強(qiáng)度（Gel Strength, 1.0%） |
≥200 (g/cm2) |
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膠凝溫度域（Geling Range, 1.5%） |
26-30℃ |
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熔膠溫度域（Melting Range, 1.5%） |
≤65℃ |
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電滲值（EEO, -mr） |
≤0.06 |
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硫酸鹽（Sulfate, %） |
≤0.10% |
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DNA酶（DNase） |
None Detected |
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RNA酶（RNase） |
None Detected |
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蛋白酶（Protease） |
None Detected |
使用說明
凝膠制備方法
1. 根據(jù)制膠量及凝膠濃度，在加有一定量的電泳緩沖液的三角錐瓶中，加入準(zhǔn)確稱量的瓊脂糖粉（總液體量不宜超過三角錐瓶的50%容量）。
2. 在微波爐中加熱瓊脂糖至完全溶解。
*必須保證瓊脂糖充分完全溶解，此時(shí)瓊脂糖膠液清澈，否則，會造成電泳圖像模糊不清。加熱時(shí)如膠液劇烈沸騰發(fā)泡，停止加熱。微波爐中加熱時(shí)間不宜過長。
- 加入翌圣YeaRed核酸染料（Cat#10202ES）或YeaGreen核酸染料（Cat#10204ES），使用終濃度為1×（即每50 mL瓊脂糖溶液中加入5 μL 10,000×核酸染料）。
- 將含有YeaRed或YeaGreen核酸染料的瓊脂糖溶液倒入制膠器并插好梳子，室溫下凝固約30-60 min。
- 按照常規(guī)方法上樣并電泳，推薦電泳電壓70-90 V，時(shí)間40-60 min。
- YeaRed紫外觀察，YeaGreen紫外、藍(lán)光觀察。
凝膠濃度及緩沖液的選擇
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瓊脂糖濃度 |
有效分離范圍（bp） |
推薦緩沖液 |
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1.2% |
400-7000 |
1×TAE |
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1.5% |
250-5000 |
1×TAE/0.5×TBE |
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2.0% |
150-3000 |
0.5×TBE |
注意事項(xiàng)
- 可用煮沸或微波加熱的方法來溶膠，瓊脂糖溶化必須徹底。溶膠可能會引起暴沸，需注意防止?fàn)C傷。
- 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
- 本產(chǎn)品僅作科研用途！
Ver.CN20241115
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