產(chǎn)品說明書
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COA
已發(fā)表文獻(xiàn)
產(chǎn)品描述
異丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）是β–半乳糖苷酶的活性誘導(dǎo)物質(zhì)，常用于藍(lán)白斑篩選及IPTG誘導(dǎo)的細(xì)菌內(nèi)的蛋白表達(dá)等。當(dāng)pUC系列的載體DNA（或其他帶有lacZ基因載體DNA）以lacZ缺失細(xì)胞為宿主進(jìn)行轉(zhuǎn)化時(shí)、或用M13噬菌體的載體DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)染時(shí)，如果在平板培養(yǎng)基中加入X–Gal和IPTG，由于β–半乳糖苷酶的α–互補(bǔ)性，可以根據(jù)是否呈現(xiàn)白色菌落（或噬菌斑）而方便地挑選出基因重組體。此外，它還可以作為具有lac或tac等啟動(dòng)子的表達(dá)載體的表達(dá)誘導(dǎo)物使用。
產(chǎn)品性質(zhì)
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中文名稱（Chinese Synonym） |
異丙基-β-D-硫代半乳糖苷 |
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英文名稱（English Synonym） |
Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside; Isopropyl β-D-thiogalactoside; |
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CAS號(hào)（CAS NO.） |
367-93-1 |
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分子式（Molecular Formula） |
C9H18O5S |
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純度（Purity, HPLC） |
≥99% |
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外觀（Appearance） |
白色粉末 |
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分子量（Molecular Weight） |
238.30 g/mol |
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結(jié)構(gòu)式（Structure） |
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運(yùn)輸與保存方法
冰袋運(yùn)輸。粉末-20℃避光保存，有效期2年。
注意事項(xiàng)
1）含有IPTG的培養(yǎng)基4℃避光保存，須在1周內(nèi)使用。
2）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
3）本產(chǎn)品僅作科研用途！
儲(chǔ)存液配制
1）稱取0.238 g IPTG；加入10 mL去離子水充分溶解IPTG粉末，配制0.1 M的儲(chǔ)存液；
2）用5-10 mL去離子水潤濕0.22 μm針孔過濾；
3）0.22 μm濾膜除菌上述IPTG溶液。分裝成1 mL，-20℃凍存，有效期可達(dá)1年。
藍(lán)白斑篩選
1. X-Gal、IPTG 加入瓊脂培養(yǎng)基溶液
1）高壓滅菌已加瓊脂的培養(yǎng)基，并冷卻到50℃左右。
2）每毫升培養(yǎng)基內(nèi)加入10 μL 20 mg/mL X-gal 溶液、10 μL 0.1 M的IPTG（使其終濃度達(dá)到1 mM）；
3）加入適量抗生素；
4）混勻后按照平板大小倒入適量培養(yǎng)基，待培養(yǎng)基冷卻至室溫后，接種細(xì)菌于37℃過夜培養(yǎng)。
2. X-Gal、IPTG加到瓊脂平板表面
1）于無菌超凈工作臺(tái)制備平板（如LB 瓊脂板）；
2）取40 μL 0.1 M IPTG和120 μL 20 mg/mL X-gal混合，均勻地涂布于準(zhǔn)備好的平板上；
【注】：平板邊緣較難充分涂布均勻，容易產(chǎn)生假陽性，因此，為了得到更好結(jié)果，建議后續(xù)操作中盡可能在平板中間挑取單克隆。
3）37℃孵育直至所有液體被吸收（30 min或更長）。接種細(xì)菌于37℃過夜培養(yǎng)直到菌落形成。
HB220811
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