——點(diǎn)亮您的印跡膜，一觸即發(fā)！
產(chǎn)品概述
ECL試劑，即化學(xué)發(fā)光法辣根過(guò)氧化物酶（HRP）底物，是目前Western blotting檢測(cè)中最為靈敏的試劑。目前市場(chǎng)上普通ECL試劑在使用過(guò)程中經(jīng)常出現(xiàn)易淬滅、高背景、不穩(wěn)定以及低豐度蛋白難以檢測(cè)等問(wèn)題，影響最終實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
翌圣生物根據(jù)現(xiàn)狀，集中免疫檢測(cè)領(lǐng)域的優(yōu)秀科研人員，在嚴(yán)格控制魯米諾原料的基礎(chǔ)上，不斷改良增強(qiáng)劑和穩(wěn)定劑配方，針對(duì)不同需求開發(fā)了4類ECL試劑，包含增強(qiáng)型、超敏型、持久型和最高靈敏度型產(chǎn)品，不僅可滿足實(shí)驗(yàn)者對(duì)目的蛋白從低豐度到高豐度表達(dá)的檢測(cè)要求，同時(shí)可在不影響實(shí)驗(yàn)的條件下，提高發(fā)光強(qiáng)度，使您獲得的圖像更加清晰。
卓越的靈敏度——皮克至低飛克級(jí)的抗原檢測(cè)
更高的信噪比——精準(zhǔn)發(fā)光底物，降低背景
更利節(jié)省抗體——優(yōu)化底物系統(tǒng)，更高抗體結(jié)合力
高性價(jià)比——更高的性能，更低的價(jià)格
極佳的穩(wěn)定性——新型氧化劑，4℃下穩(wěn)定保存1年
產(chǎn)品原理
ECL試劑檢測(cè)的核心原理為氧化反應(yīng)發(fā)光：魯米諾（lumino）作為發(fā)光底物的主要成分，在堿性條件下，通過(guò)辣根過(guò)氧化酶（HRP）催化，被H2O2氧化生成3-氨基鄰苯二酸的激發(fā)態(tài)中間體，當(dāng)其回到基態(tài)時(shí)發(fā)出光子，最大發(fā)射波長(zhǎng)為425 nm，光子信號(hào)可通過(guò)X射線膠片或CCD成像儀被捕獲。
選擇指南
翌圣目前擁有的4種ECL產(chǎn)品，各具特色，能夠完全滿足用戶的免疫印跡應(yīng)用需求。
那么，您的實(shí)驗(yàn)應(yīng)該選擇哪一種產(chǎn)品呢？
表1. ECL試劑選擇指南
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Yeasen |
Enhanced ECL 增強(qiáng)型 |
Super ECL 超敏型 |
SuperDura 持久型 |
MaxiSignal 最高靈敏度型 |
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適用樣本 |
靶點(diǎn)豐度較高，常規(guī)蛋白樣本 |
靶點(diǎn)豐度低，樣本有限 |
靶點(diǎn)豐度較低，樣本有限 |
靶點(diǎn)豐度極低，樣品珍貴 |
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檢測(cè)靈敏度 |
中等皮克級(jí) |
低皮克級(jí) |
中等飛克級(jí) |
低飛克級(jí) |
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信號(hào)持續(xù)時(shí)間 |
< 2 h |
< 12 h |
< 24 h |
< 8 h |
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適用檢測(cè)系統(tǒng) |
所有試劑均適用X射線膠片，CCD成像儀 |
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一抗稀釋濃度 |
1:1000-1:4000 |
1:1000-1:10,000 |
1:1000-1:50,000 |
1:5000-1:100,000 |
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二抗稀釋濃度 |
1:1000-1:4000 |
1:2000-1:10,000 |
1:50,000-1:250,000 |
1:100,000-1:500,000 |
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推薦用膜 |
NC膜 |
NC膜或PVDF膜 |
NC膜或PVDF膜 |
NC膜或PVDF膜 |
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存儲(chǔ)穩(wěn)定性 |
室溫1年 |
室溫1年 |
室溫1年 |
4℃ 1年，室溫半年 |
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優(yōu)勢(shì) |
同一級(jí)別靈敏度中信號(hào)最強(qiáng) |
性價(jià)比最高，適用于多數(shù)WB實(shí)驗(yàn) |
最長(zhǎng)信號(hào)持續(xù)時(shí)間，極其適用于多次曝光 |
卓越靈敏度，極其適用于痕量蛋白檢測(cè) |
【注】：推薦抗體稀釋濃度為抗體儲(chǔ)液濃度為1 mg/mL時(shí)的稀釋濃度。
產(chǎn)品應(yīng)用
Yeasen ECL試劑對(duì)比其他品牌同級(jí)別產(chǎn)品具有更佳的使用效果.
圖1. Yeasen ECL超敏型底物Super與品牌T同級(jí)別底物Pico檢測(cè)效果比對(duì)
圖2. Yeasen ECL最高靈敏度型底物MaxiSignal與其他品牌同級(jí)別底物West Femto檢測(cè)效果比對(duì)
圖3. Yeasen ECL持久型底物SuperDura與其他品牌同級(jí)別底物West Dura檢測(cè)效果比對(duì)
客戶好評(píng)
中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所
圖4. Yeasen ECL超敏型底物Super相對(duì)品牌M同級(jí)別底物Crescendo，檢測(cè)靈敏度更高
中國(guó)藥科大學(xué)
圖5. Yeasen ECL超敏型底物Super相對(duì)品牌T同級(jí)別底物Pico，檢測(cè)靈敏度更高，結(jié)果重現(xiàn)性更好
上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院
圖6.使用Yeasen ECL增強(qiáng)型底物Enhanced檢測(cè)目的蛋白，獲得清晰銳利的條帶
發(fā)表文獻(xiàn)
[1] Wang Z, Liu C, Zhu D, et al. Untangling the co-effects of oriented nanotopography and sustained anticoagulation in a biomimetic intima on neovessel remodeling[J]. Biomaterials. 2020;231:119654. (IF:10.317)
[2] Shang J M , Ma S R, Zang C X, et al. Gut microbiota mediates the absorption of FLZ, a new drug for Parkinson’s disease treatment[J]. Acta Pharmaceutica Sinica B 2021;11(5):1213-1226. (IF:11.4)
價(jià)格優(yōu)勢(shì)
.
圖7.Yeasen ECL產(chǎn)品與其他品牌同級(jí)別產(chǎn)品價(jià)格比對(duì)
常見問(wèn)題
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遇到的問(wèn)題 |
原因分析 |
推薦解決方法 |
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膠片出現(xiàn)反影 |
反應(yīng)系統(tǒng)中HRP量過(guò)多 |
稀釋HRP標(biāo)記物 |
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膠片出現(xiàn)棕色或黃色條帶 |
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熒光猝滅 |
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操作時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，膜逐漸干掉 |
避免膜干掉 |
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保鮮膜、顯影液或定影液污染 |
養(yǎng)成良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣 |
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反應(yīng)系統(tǒng)中HRP量過(guò)少 |
增加HRP標(biāo)記物 |
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膠片無(wú)條帶顯現(xiàn)或者信號(hào)較弱 |
轉(zhuǎn)膜的效率低 |
提高轉(zhuǎn)膜效率，用預(yù)染Marker判斷。 |
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抗原、抗體量少或不匹配 |
增加抗原/抗體量或選擇合適抗原/抗體 |
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X光膠片有問(wèn)題 |
曝光后X光譜全黑（而非透明色），則表明膠片已完全曝光，使用新的X光片 |
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顯影/定影液有問(wèn)題 |
可預(yù)先曝光一張膠片進(jìn)行判斷，如有問(wèn)題當(dāng)換用新的顯影/定影液 |
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反應(yīng)系統(tǒng)中HRP量過(guò)多 |
稀釋HRP標(biāo)記物 |
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高背景 |
一抗二抗?jié)舛忍?/span> |
降低抗體濃度，延長(zhǎng)封閉時(shí)間 |
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抗體未清洗干凈 |
增加洗膜次數(shù) |
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封閉不完全 |
優(yōu)化封閉條件 |
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使用錯(cuò)誤的封閉劑 |
使用其他的封閉劑 |
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過(guò)度曝光 |
降低曝光時(shí)間 |
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抗體特異性差 |
更換優(yōu)質(zhì)抗體 |
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反應(yīng)系統(tǒng)中HRP量過(guò)多 |
稀釋HRP標(biāo)記物 |
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條帶有空斑 |
抗原以及二抗的濃度過(guò)高 |
稀釋樣品重新跑膠，也可將混合好的顯色液冰浴后，加到膜上即刻快速顯色。 |
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帶型不規(guī)則 |
轉(zhuǎn)膜有氣泡或甲醇（對(duì)于PVDF膜）水化不均勻 |
優(yōu)化轉(zhuǎn)膜條件。 |
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膠片出現(xiàn)斑點(diǎn) |
HRP標(biāo)記物聚集體 |
0.2μm膜過(guò)濾HRP標(biāo)記物 |
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非特異性條帶 |
反應(yīng)系統(tǒng)中HRP量過(guò)多 |
稀釋HRP標(biāo)記物 |
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SDS引起蛋白非特異性結(jié)合 |
實(shí)驗(yàn)流程中不使用SDS |
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抗體特異性差 |
更換優(yōu)質(zhì)抗體 |
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封閉不足 |
增加封閉時(shí)間或使用其他封閉劑 |
訂購(gòu)信息
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產(chǎn)品名稱 |
貨號(hào) |
規(guī)格 |
價(jià)格 |
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化學(xué)發(fā)光超敏顯色試劑盒 |
36208ES60 |
100 mL |
395.00 |
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36208ES76 |
500 mL |
1655.00 |
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Enhanced ECL Chemiluminescent Substrate Kit 增強(qiáng)型ECL化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒 |
36222ES60 |
100 mL |
325.00 |
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36222ES76 |
500 mL |
1255.00 |
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SuperSignal SuperDura Extended Duration Substrate 持久性化學(xué)發(fā)光底物 |
36223ES10 |
10 mL |
267.00 |
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36223ES60 |
100 mL |
1557.00 |
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36223ES70 |
200 mL |
2857.00 |
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36223ES76 |
500 mL |
5257.00 |
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SuperSignal MaxiSignal Maximum Sensitivity Substrate 最高靈敏度化學(xué)發(fā)光底物 |
36224ES10 |
10 mL |
287.00 |
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36224ES60 |
100 mL |
1757.00 |
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36224ES70 |
200 mL |
3257.00 |
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36224ES76 |
500 mL |
5857.00 |
相關(guān)產(chǎn)品
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產(chǎn)品名稱 |
貨號(hào) |
規(guī)格 |
價(jià)格 |
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36243ES35 |
5×7英寸 |
129.00 |
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36243ES58 |
8×10英寸 |
169.00 |
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36209ES01 |
1盒(100片) |
223.00 |
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36210ES01 |
包 |
23.00 |
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36211ES01 |
包 |
23.00 |
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36206ES60 |
100 mL |
147.00 |
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36206ES76 |
500 mL |
538.00 |
