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      干貨分享|深入探索全能核酸酶在生物制藥及基礎科研中的應用

       

      全能核酸酶(UltraNuclease)是一種高效的非特異性核酸內切酶,能夠廣泛降解DNA和RNA,包括單鏈、雙鏈、線性、環(huán)狀和超螺旋結構。其由特定氨基酸序列構成的三維蛋白質結構,賦予了其識別和切割各種核酸的能力。

       

      基于全能核酸酶獨特而強大的特性,在生物制藥領域以及科學研究中,無論是在細胞的處理,還是蛋白的相關研究中,它都發(fā)揮著至關重要且無可替代的巨大作用。

       

       

       

      01

      生物制藥領域中的應用

       

      在生物制藥領域,全能核酸酶的應用價值尤為顯著。在生產(chǎn)重組蛋白、疫苗以及抗體藥物等過程中,宿主細胞核酸的殘留往往是影響產(chǎn)品純度和質量的關鍵因素。全能核酸酶能夠高效且特異性地降解這些殘留核酸,顯著提高生物制品的純度,降低潛在的免疫原性風險。此外,通過對核酸的降解,它能有效地降低溶液的粘度,改善產(chǎn)品的過濾和分離特性,從而優(yōu)化整個生產(chǎn)工藝流程,提高生產(chǎn)效率和產(chǎn)品質量的穩(wěn)定性。

      1. 宿主細胞殘留核酸的清除

      在生物制藥中,宿主細胞DNA和RNA的殘留是影響產(chǎn)品質量和安全性的關鍵因素。全能核酸酶能夠高效地降解這些殘留核酸:

      • 降低免疫原性:宿主細胞DNA可能觸發(fā)免疫反應,全能核酸酶通過降解DNA,降低了這種風險;

      • 提高純度:核酸的降解有助于提高最終產(chǎn)品的純度,減少可能的污染源。

      2. 生物制品的穩(wěn)定性和活性

      全能核酸酶通過降解可能與病毒載體或蛋白結合的核酸,減少非特異性吸附,從而提高產(chǎn)品的穩(wěn)定性和生物活性:

      • 防止蛋白質聚集:核酸的降解減少了蛋白質之間的非特異性相互作用,有助于維持蛋白質的穩(wěn)定性和活性;

      • 避免非特異性結合:核酸的降解減少了蛋白質與核酸的非特異性結合,從而減少了可能影響藥物活性的復合物的形成。

      3. 生物制品的純化和分離

      全能核酸酶在病毒載體及蛋白的純化過程中,有助于去除雜質,提高病毒載體及蛋白的純度,確保質量:

      • 改善層析效率:核酸的降解改善了層析介質的流動力學特性,使得蛋白質能夠更高效地被分離。

      • 減少樣品損失:通過減少核酸引起的非特異性吸附,全能核酸酶有助于減少在純化過程中的樣品損失。

      4. 生物制品的質量控制

      全能核酸酶在生物制品的質量控制過程中,通過降解核酸雜質,有助于提高生物制品的質量,滿足藥品監(jiān)管機構的要求:

      • 核酸殘留檢測:通過測定全能核酸酶的活性,可以間接評估生物制品中核酸殘留的水平;

      • 驗證工藝的穩(wěn)定性:全能核酸酶的使用效果可以作為驗證生物制藥工藝穩(wěn)定性的一個指標。

      5. 工藝優(yōu)化和放大

      全能核酸酶在生物制品的規(guī)?;a(chǎn)中,有助于提高生產(chǎn)效率,降低生產(chǎn)成本,滿足大規(guī)模生產(chǎn)的需求:

      • 反應條件的優(yōu)化:需要根據(jù)具體的生物制品和工藝流程,優(yōu)化全能核酸酶的使用條件,包括酶的濃度、作用時間和溫度等。

      • 規(guī)?;a(chǎn):在規(guī)?;a(chǎn)中,全能核酸酶的使用需要考慮到成本效益和操作的可行性。

       

       

      02

      基礎科研-細胞培養(yǎng)及蛋白制備中的應用

       

      在細胞培養(yǎng)方面,全能核酸酶也發(fā)揮著不可或缺的作用。當細胞裂解以獲取其中的目標成分時,大量釋放的核酸會導致溶液粘度增加、蛋白提取困難等問題。全能核酸酶的引入能夠迅速降解這些核酸,避免其對后續(xù)的蛋白提取和純化等實驗步驟造成干擾,確保實驗結果的準確性和可靠性。

      1. 細胞培養(yǎng)中的核酸污染控制

      在細胞培養(yǎng)過程中,細胞裂解后釋放的核酸(DNA和RNA)會迅速形成粘稠的溶液,這不僅增加了溶液的粘度,還可能與蛋白質相互作用,形成難以分離的復合物。全能核酸酶通過以下方式解決這些問題:

      • 核酸降解:全能核酸酶能夠迅速降解細胞裂解液中的DNA和RNA,減少溶液的粘稠度,從而改善細胞培養(yǎng)液的流動性;

      • 避免非特異性結合:核酸分子可能與目標蛋白非特異性結合,影響后續(xù)的分離和純化步驟。全能核酸酶通過降解這些核酸,減少了這種非特異性結合的可能性。

      2. 蛋白提取和純化

      在蛋白質的提取和純化過程中,全能核酸酶的應用至關重要:

      • 提高提取效率:通過降解核酸,全能核酸酶降低了溶液的粘度,使得細胞裂解液更容易通過過濾或離心等方法進行處理,提高了蛋白的提取效率。

      • 減少樣品損失:核酸的降解減少了在過濾或離心過程中可能發(fā)生的樣品吸附和損失,從而提高了蛋白的回收率。

      • 優(yōu)化層析條件:核酸的降解有助于改善層析介質的流動力學特性,使得蛋白質能夠在更短的時間內以更高的分辨率被分離。

      3. 蛋白質穩(wěn)定性和活性

      全能核酸酶在保持蛋白質穩(wěn)定性和活性方面也發(fā)揮著作用:

      • 防止蛋白質聚集:核酸的降解減少了蛋白質之間通過核酸橋接而發(fā)生的聚集,有助于保持蛋白質的單體狀態(tài)和活性。

      • 避免酶切:在某些情況下,核酸酶的存在可能會對蛋白質造成意外的酶切,全能核酸酶通過降解核酸,減少了這種風險。

      4. 實驗操作的優(yōu)化

      在實驗操作層面,全能核酸酶的使用需要精確控制:

      • 反應條件的優(yōu)化:全能核酸酶的活性受溫度、pH值和離子強度等因素的影響。因此,需要根據(jù)實驗的具體條件優(yōu)化這些參數(shù),以確保酶的最佳活性;

      • 酶濃度和作用時間:適量的酶濃度和適當?shù)淖饔脮r間對于實現(xiàn)高效的核酸降解至關重要。過多的酶或過長的作用時間可能會對蛋白質造成不必要的損傷。

       

       

      在生物制藥和生物技術領域,使用全能核酸酶還需要考慮安全性和合規(guī)性:

      • 殘留物控制:需要確保全能核酸酶及其降解產(chǎn)物在最終產(chǎn)品中的殘留量符合安全標準。

      • 監(jiān)管要求:全能核酸酶的使用和殘留控制需要符合各國藥品監(jiān)管機構的要求,如美國FDA、歐洲EMA等。

       

      翌圣生物始終專注于為生物制藥領域提供符合標準的核心原料。為充分滿足客戶的多樣化需求,翌圣生物精心開發(fā)了全能核酸酶以及耐高鹽全能核酸酶等產(chǎn)品,能夠精準適配客戶不同料液中鹽離子濃度的具體需求。其 GMP 級別產(chǎn)品的生產(chǎn)過程嚴格遵循 ISO13485 質量體系的規(guī)范進行,已經(jīng)成功協(xié)助多家客戶順利完成 IND 申報,積累了極為豐富的項目經(jīng)驗。
       
       
       

       

       

       

      03

      產(chǎn)品信息

       

      產(chǎn)品名稱

      產(chǎn)品貨號

      產(chǎn)品規(guī)格

      UCF.ME® UltraNuclease 全能核酸酶(同Benzonase)

      20156ES25/50/60/

      25KU/50KU/100KU

      UCF.ME®UltraNuclease GMP-grade全能核酸酶(同Benzonase)

      20157ES25/50/60/80/90

      25KU/50KU/100KU/1MU/5MU

      Salt Active UltraNuclease GMP-grade 耐高鹽全能核酸酶

      20159ES25/50/60/80/90

      25KU/50KU/100KU/1MU/5MU

       

      04

      其他相關產(chǎn)品

       

      產(chǎn)品名稱

      產(chǎn)品貨號

      產(chǎn)品規(guī)格

      UCF.ME® UltraNuclease ELISA Kit全能核酸酶檢測試劑盒

      36701ES59

      96T

      Salt Active UltraNuclease ELISA kit耐高鹽全能核酸酶檢測試劑盒

      36703ES96

      96T

      400-6111-883