產(chǎn)品簡介

AapCas12b核酸酶（又名C2c1）是由tracrRNA:crRNA（或sgRNA）介導(dǎo)的DNA核酸內(nèi)切酶，來源于嗜酸耐熱菌Alicyclobacillus acidophilus，在靶標(biāo)雙鏈DNA存在PAM（TTN）序列的情況下，特異地剪切靶標(biāo)雙鏈DNA，使DNA雙鏈斷裂并生成粘性末端。AapCas12b可不依賴PAM序列特異地剪切單鏈DNA靶標(biāo)。雙鏈或單鏈DNA靶標(biāo)均能激活A(yù)apCas12b的反式剪切活性（即旁路剪切活性/附屬剪切活性），即當(dāng)AapCas12b酶與sgRNA、靶標(biāo)DNA結(jié)合形成三元復(fù)合物后，便會被激活針對非特異序列ssDNA的反式剪切活性，將體系中的任意序列ssDNA切碎。AapCas12b最佳剪切反應(yīng)溫度為60℃，比AacCas12b更耐高溫，適用于與LAMP聯(lián)用，開發(fā)恒溫?cái)U(kuò)增/CRISPR-Cas檢測體系。

 

產(chǎn)品信息

貨號	14808ES65/14808ES80
規(guī)格	100 pmol/1,000 pmol
活性定義	在總體積為20 μL含有1×反應(yīng)Buffer的反應(yīng)體系中，60℃下，1 min內(nèi)剪切1 pmol ssDNA探針?biāo)璧腃as12b酶量定義為1 U。

 

組分信息

組分編號	產(chǎn)品名稱	14808ES65	14808ES80
14808-A	AapCas12b Nuclease (10 μM)	10 μL	100 μL
14808-B	10×Reaction buffer	1 mL	1 mL

 

儲存條件

-25~-15℃保存，有效期2年。

 

使用說明

1.在RNase free離心管中配制如下混合液：

組分	體積 (μL)
10×Reaction buffer	2
AapCas12b Nuclease (10 μM)	0.5
sgRNA (10 μM)	0.5
Target DNA (1 μM)*	0.5
DEPC水	Up to 20

*：順式剪切體系中Target DNA可為ssDNA或帶PAM序列的dsDNA。

2.60℃反應(yīng) 30 min~1 h，85℃滅活5 min，核酸電泳分析順式剪切產(chǎn)物。

 

注意事項(xiàng)

1. 本產(chǎn)品僅作科研用途。

2. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。

 

Ver.CN20231127