產(chǎn)品描述

本品是采用大腸桿菌TOP10菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞，可用于DNA的化學轉(zhuǎn)化，轉(zhuǎn)化效率可達10⁸ cfu/μg DNA以上，廣泛適用于高效的DNA克隆和質(zhì)粒擴增，能保證高拷貝質(zhì)粒的穩(wěn)定遺傳?？捎糜跇嫿寺?，藍白斑篩選等，具有鏈霉素(Str^R )抗性。

TOP10感受態(tài)細胞基因型：F^-mcrA △(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZ△M15 △lacX74 recA1 ara△139 △(ara-leu) 7697 galU galK rpsL (Str^R ) endA1 nupG

 

產(chǎn)品組分

組分編號	組分名稱	產(chǎn)品編號/規(guī)格
		11801ES80	11801ES92
11801-A	TOP10 感受態(tài)細胞	10×100 μL	100×100 μL

 

運輸與保存方法

干冰運輸；-80℃保存，有效期6個月。請勿將本品置于-20℃或者液氮中保存。

 

注意事項

1. 本產(chǎn)品應保存在-80℃，不可反復凍融，以免降低感受態(tài)細胞的轉(zhuǎn)化效率。

2. 本產(chǎn)品在冰中解凍時間不宜過長，感受態(tài)細胞剛化凍時轉(zhuǎn)化效率最高。

3. 混入質(zhì)粒時應輕柔操作。

4. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。

5. 本產(chǎn)品僅作科研用途！

 

使用方法

1. 取100 μL感受態(tài)細胞，冰浴、解凍（大約5 min）。

2. 立即向解凍后的感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA，輕輕彈勻，冰浴靜置25 min。

【注】：所加DNA體積不要超過感受態(tài)細胞懸液體積的十分之一。

3. 42℃水浴中熱激45 sec，然后快速將EP管轉(zhuǎn)移到冰上，靜置2 min。

【注】：此過程不要晃動，否則會降低轉(zhuǎn)化效率。

4. 向離心管中加入700 μL左右不含抗生素的LB或2YT培養(yǎng)基，混勻后37℃，200 rpm復蘇60 min。

5. 5000 rpm離心1 min收集菌體，留取100 μL左右上清涂布至含有相應抗生素的培養(yǎng)板上，37℃培養(yǎng)過夜。如進行藍白斑篩選操作，請將平板放37℃培養(yǎng)至少13 h。

 

HB220614