產(chǎn)品描述

ER-Tracker探針是一系列具有細胞膜透過性，對活細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)具有高度選擇性的探針，不像傳統(tǒng)的DiOC6(3)，該系列探針幾乎不對線粒體著色，且在較低濃度即可實現(xiàn)對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的染色，且對細胞幾乎無毒性。使用以下提供的優(yōu)化步驟對活細胞染色后用醛固定，可以部分保留活細胞的染色特征。

本品為ER-Tracker Blue-White DPX，Ex= 374 nm，Em= 430-640 nm，藍色熒光，屬于DapoxylTM(DPX)家族成員之一。DPX系列染料均具有長發(fā)射波長、高吸光系數(shù)、高量子產(chǎn)量、較大斯托克司頻移等特點。但這些染料具有環(huán)境敏感性，會隨之出現(xiàn)極性增強、最大熒光波長偏移到更高波長處、量子產(chǎn)量下降等現(xiàn)象。

本品為溶于DMSO的1 mM ER-Tracker Blue-White DPX儲存液，推薦工作濃度為100 nM-1 μM。

產(chǎn)品性質(zhì)

分子式（Formula）	C26H21F5N4O4S
分子量（Molecular Weight）	580.53
外觀（Appearance）	Yellow Solution
Ex/Em	374/430-640 nm
濾片（Filter）	DAPI or UV longpass
結(jié)構(gòu)式（Structure）

運輸和保存方法

冰袋運輸。≤-20℃避干燥保存，一年效期。避免反復凍融。

注意事項

1）避免反復凍融，可根據(jù)單次用量分裝保存。避免將本品儲存于無霜冰箱。

2）DMSO有毒，請小心操作。

3）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

4）本產(chǎn)品僅作科研用途！

使用方法

本實驗方案經(jīng)牛肺動脈內(nèi)皮細胞優(yōu)化，且已被其他常規(guī)細胞系驗證。但不同的細胞類型其最佳使用條件不同，還需用戶根據(jù)該方案進行進一步優(yōu)化。

1. 試劑準備

使用前將ER-Tracker Blue-White DPX回溫至室溫，并簡短離心使該DMSO溶液至管底。

2. 細胞樣品處理及染色

2.1 將1 mM ER-Tracker Blue-White DPX儲存液按照實驗要求稀釋至工作濃度，推薦工作濃度100 nM-1µM。建議在不影響實驗結(jié)果的前提下盡量使用較低濃度探針，以避免由于濃度過高染色導致的假象。

注：使用含Ca2+、Mg2+ Hank’s 平衡鹽溶液（HBSS/Ca/Mg）稀釋該探針進行染色，可得到最佳實驗結(jié)果。

2.2 染色

對于貼壁細胞，吸除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基，用HBSS清洗細胞，加入預熱的染料工作液于37℃孵育細胞15-30 min。吸除染色液，加入不含探針的新鮮培養(yǎng)液，并在熒光顯微鏡下觀察細胞。
        注：由于ER-Tracker Blue-White DPX探針具有較高光敏感性，會產(chǎn)生波動較大的發(fā)射吸收峰值，使用長通DAPI濾光片效果最理想。 另，操作過程中需盡量避光。

細胞如需固定，請參考以下步驟。

3． 細胞固定及透化處理

3.1 固定細胞：用4%甲醛于37℃固定細胞10-20 min。

注：已染色細胞用醛固定后，僅部分ER-Tracker Blue-White DPX留在細胞內(nèi)，熒光信號會有部分衰減。

3.2 （可選）透化處理：若細胞還需進行后續(xù)染色，需對細胞利用0.2% TritonX-100 透化10 min。

3.3 清洗觀察細胞：細胞固定后，可用合適緩沖液進行清洗，每次5 min，共2次。鏡檢即可。

相關(guān)產(chǎn)品

40761ES50	ER-Tracker Blue-White DPX, for live-cell imaging 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)藍色熒光探針（活細胞）	50 µL(1mM)
40763ES20	ER-Tracker Green (BODIPY® FL Glibenclamide),for live-cell imaging 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)綠色熒光探針	20 µL (1mM)
40764ES20	ER-Tracker Red (BODIPY® TR Glibenclamide),for live-cell imaging 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)紅色熒光探針	20 µL (1mM)
40765ES30	Golgi-Tracker Green (BODIPY® FL C5-Ceramide) 高爾基體綠色熒光探針	30 µL (1mM)
40741ES50	MitoTracker® Red CMXRos 線粒體紅色熒光探針	50 µg
40742ES50	MitoTracker® Green FM 線粒體綠色熒光探針	50 µg
40743ES50	MitoTracker® Deep Red FM 線粒體遠紅色熒光探針	50 µg
40738ES50	LysoTracker Green DND-26 溶酶體綠色熒光探針	50 μL
40739ES50	LysoTracker Red DND-99 溶酶體紅色熒光探針	50 μL
36314ES60	4% Paraformaldehyde 4%多聚甲醛	100 mL
36314ES76		500 mL
20107ES72	Triton X-100 曲拉通X-100	250 mL
60162ES76	1× HBSS (with Ca2+, Mg2+), pH 7.4	500 mL