產(chǎn)品描述

 

臺(tái)盼藍(lán)(Trypan Blue)，一種偶氮、親水性酸性藍(lán)色染料，可透過死亡細(xì)胞和垂死細(xì)胞的細(xì)胞膜，將其染成藍(lán)色，而活 細(xì)胞由于其細(xì)胞膜的完整性， 可將臺(tái)盼藍(lán)排斥在外， 因此， 通過顏色的變化即可將活細(xì)胞(活細(xì)胞呈透明無色) 和死細(xì)胞鑒 別開來， 基于此原理， 本品廣泛用于細(xì)胞活性水平的常規(guī)評(píng)估。臺(tái)盼藍(lán)還可染色膠原和淀粉樣蛋白。臺(tái)盼藍(lán)與蛋白結(jié)合形成 的復(fù)合物可發(fā)出紅色熒光。另外，臺(tái)盼藍(lán)(合適濃度)還常用來淬滅細(xì)胞表面的自熒光或者其他熒光信號(hào)。

本試劑盒各組分均以無菌形式提供， 可直接用于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。按照單次使用量 0.1mL，40208ES60 和 40208ES76 分別可供 檢測(cè) 100 次和 500 次。

 

產(chǎn)品組分

 

組分編號(hào)	組分名稱	產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格
		40208ES60/100T	40208ES76/500T
40208-A	細(xì)胞重懸液  Cell Dilution Buffer	100 mL	250 mL×2
40208-B	2×臺(tái)盼藍(lán)染液  2×Typan Blue Stain	10 mL	50 mL

 

 

運(yùn)輸和保存方法

 

室溫運(yùn)輸和保存即可，二年有效。

 

注意事項(xiàng)

 

1) 細(xì)胞計(jì)數(shù)前需對(duì)細(xì)胞進(jìn)行充分的清洗， 因?yàn)榧?xì)胞對(duì)血清蛋白具有非常高的親和力， 殘留血清蛋白會(huì)導(dǎo)致較暗的染色背景。 2)臺(tái)盼藍(lán)對(duì)人體有害，請(qǐng)注意小心防護(hù)。

3)為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 

使用方法

 

1)對(duì)于懸浮細(xì)胞，離心收集細(xì)胞，對(duì)其充分清洗后，加入適量細(xì)胞重懸液重懸細(xì)胞制成單細(xì)胞懸液；對(duì)于貼壁細(xì)胞，先用 胰酶消化細(xì)胞，再按照懸浮細(xì)胞的方法制備單細(xì)胞懸液。

2)取 0.1 mL 單細(xì)胞懸液，按照 1:1 比例與 0.1 mL 0.4%臺(tái)盼藍(lán)染色液充分混勻，室溫染色 3~10 min。

 3) 取少量上述染色細(xì)胞加入血細(xì)胞計(jì)數(shù)板， 于顯微鏡低倍鏡下計(jì)數(shù)， 分別計(jì)算著色細(xì)胞(即損傷細(xì)胞和死細(xì)胞) 和總細(xì)胞。 【注 1】：用移液槍加染色細(xì)胞時(shí)，沿著蓋玻片的邊緣輕輕加液使其完全覆蓋住整個(gè)小室。不可過量加液或者不足量。   【注 2】： 1 mm2 方格內(nèi)細(xì)胞數(shù)通?？刂圃?/span> 20-50 cells，當(dāng)細(xì)胞數(shù)超過 200 個(gè)，需重新調(diào)整稀釋倍數(shù)。

4)按照以下公式來計(jì)算細(xì)胞數(shù)目和活細(xì)胞百分比，

a，計(jì)算每 mL 細(xì)胞數(shù)目： Cells/mL=1 mm2 大方格內(nèi)的平均細(xì)胞數(shù)×稀釋倍數(shù)×104；

【注】：此時(shí)的稀釋倍數(shù)為：步驟 2 所取的單細(xì)胞懸液與臺(tái)盼藍(lán)染色液混合后的稀釋倍數(shù)

b ，總細(xì)胞數(shù)目： Total cells=  (Cells/mL) ×最初制備單細(xì)胞懸液的總體積

c，細(xì)胞活力值： Viability  (%) =  (總細(xì)胞數(shù)-總著色細(xì)胞數(shù)) /總細(xì)胞數(shù)×100

【注】：通常情況，健康的對(duì)數(shù)期培養(yǎng)細(xì)胞，活細(xì)胞至少占到 95%。

HB220505