----Anti-Flag/HA/Myc純化凝膠、純化磁珠、免疫磁珠
標(biāo)簽抗體簡(jiǎn)介
標(biāo)簽抗體（Tag Antibody）可用于檢測(cè)和純化各種商品化表達(dá)載體上的標(biāo)簽序列，以分析檢測(cè)目的蛋白的表達(dá)含量及其功能。其原理是抗原—抗體反應(yīng)，這些標(biāo)簽抗體可以高度特異地結(jié)合對(duì)應(yīng)的標(biāo)簽融合蛋白。以下簡(jiǎn)單列舉幾個(gè)常見(jiàn)的適合使用標(biāo)簽抗體結(jié)合的蛋白標(biāo)簽。
表1. 不同蛋白標(biāo)簽介紹
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標(biāo)簽 |
序列 |
特點(diǎn) |
適用場(chǎng)景 |
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Flag |
DYKDDDDK |
1、分子量小，不改變?nèi)诤系鞍椎墓δ?，比同類?biāo)簽更具親水性； 2、含有腸激酶識(shí)別位點(diǎn)（DDDDK），融合在目標(biāo)蛋白N端便于去除標(biāo)簽。 |
適用于真核表達(dá)系統(tǒng)低表達(dá)水平融合蛋白的純化、檢測(cè) |
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HA |
YPYDVPDYA |
源于流感病毒的紅細(xì)胞凝集素表面抗原決定簇，避免用于凋亡細(xì)胞。 |
蛋白的純化、檢測(cè) |
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Myc |
Glu-Gln-Lys-Leu-Ile-Ser- Glu-Glu-Asp-Leu |
來(lái)源于人類原癌基因Myc，避免用于人源細(xì)胞相關(guān)實(shí)驗(yàn)。 |
一般不用于蛋白純化，適用于檢測(cè) |
翌圣標(biāo)簽抗體親和純化產(chǎn)品選擇指南
翌圣標(biāo)簽抗體親和純化類產(chǎn)品，以高質(zhì)量的鼠源IgG單克隆抗體為原料，通過(guò)共價(jià)偶聯(lián)的方式將其定向、高效的偶聯(lián)到瓊脂糖凝膠、瓊脂糖磁珠、納米磁珠表面，不僅降低了蛋白的非特異性結(jié)合、實(shí)現(xiàn)了介質(zhì)較高的抗體載量，同時(shí)也獲得了適用于不同純化要求的標(biāo)簽抗體純化產(chǎn)品，涵蓋不同標(biāo)簽抗體的純化凝膠、純化磁珠、免疫磁珠，方便使用手動(dòng)或自動(dòng)化方式純化標(biāo)簽蛋白、免疫沉淀實(shí)驗(yàn)。
純化凝膠、純化磁珠、免疫磁珠區(qū)別介紹
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純化凝膠 |
純化磁珠 |
免疫磁珠 |
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基質(zhì) |
瓊脂糖凝膠 |
瓊脂糖磁珠 |
硅基磁珠 |
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粒徑 |
45-165 µm |
30-100 µm |
200 nm |
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電鏡視野 |
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結(jié)合能力 |
天然的多孔結(jié)構(gòu)，載量最大，特異性稍差 |
具有瓊脂糖的結(jié)合能力，同時(shí)可以通過(guò)磁性分離 |
納米級(jí)磁珠提供超大比表面積，具有更多的結(jié)合位點(diǎn)，非特異性吸附率低 |
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計(jì)量單位 |
瓊脂糖凝膠和瓊脂糖磁珠因?yàn)楹写罅康乃郑娓珊鬅o(wú)法較為準(zhǔn)確的計(jì)算成品質(zhì)量濃度，因此成品按體積（mL）計(jì)算 |
磁珠是一種納米級(jí)別的微球，分散在溶液中，按質(zhì)量濃度計(jì)算，通過(guò)取一定體積的磁珠烘干，稱重，得到質(zhì)量濃度（mg/mL） |
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應(yīng)用建議 |
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1、搭配磁性分離快速便捷的進(jìn)行小量蛋白純化。 2、也可用于免疫沉淀（IP）或免疫共沉淀（Co-IP） |
1、特別適合用于免疫沉淀（IP）或免疫共沉淀（Co-IP） |
翌圣標(biāo)簽抗體純化產(chǎn)品選購(gòu)指南
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產(chǎn)品系列 |
純化樹(shù)脂系列 |
純化磁珠系列 |
免疫磁珠系列 |
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產(chǎn)品貨號(hào) |
20584ES |
20586ES |
20587ES |
20785ES |
20786ES |
20787ES |
20564ES |
20565ES |
20566ES |
20567ES |
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產(chǎn)品名稱 |
Anti-Flag親和純化凝膠 |
Anti-HA親和純化凝膠 |
Anti-Myc親和純化凝膠 |
Anti-Flag純化磁珠 |
Anti-HA純化磁珠 |
Anti-Myc純化磁珠 |
Anti-GFP免疫磁珠 |
Anti-Flag免疫磁珠 |
Anti-HA 免疫磁珠 |
Anti-Myc免疫磁珠 |
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配基 |
高質(zhì)量的鼠源抗Flag/HA/Myc單克隆抗體 |
高質(zhì)量的鼠源抗Flag/HA/Myc單克隆抗體 |
高質(zhì)量的鼠源抗GFP/Flag/HA/Myc單克隆抗體 |
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蛋白結(jié)合量 |
≥1.1 mg Flag標(biāo)簽融合蛋白/mL凝膠 ≥1.5 mgHA標(biāo)簽融合蛋白/mL凝膠 |
≥1.0 mg Flag標(biāo)簽融合蛋白/mL磁珠 ≥1.0 mg HA標(biāo)簽融合蛋白/mL磁珠 ≥0.5 mg Myc標(biāo)簽融合蛋白/mL磁珠 |
≥0.8 mg GFP標(biāo)簽融合蛋白/mL磁珠 ≥0.6 mg Flag標(biāo)簽融合蛋白/mL磁珠 ≥0.4 mg HA標(biāo)簽融合蛋白/mL磁珠 ≥0.5 mg Myc標(biāo)簽融合蛋白/mL磁珠 |
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基質(zhì) |
4%交聯(lián)的瓊脂糖凝膠 |
瓊脂糖磁珠 |
硅基磁珠 |
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平均粒徑 |
45-165 µm |
30-100 µm |
200 nm |
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優(yōu)勢(shì) |
非特異性結(jié)合低，高載量 |
載量高，配套磁力架使用方便 |
高純度，高載量，高特異性，配套磁力架使用方便 |
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推薦應(yīng)用 |
任意規(guī)模標(biāo)簽融合蛋白純化、免疫沉淀（IP） |
搭配磁性分離快速便捷的進(jìn)行小量蛋白純化、免疫沉淀（IP）或免疫共沉淀（Co-IP） |
免疫沉淀（IP）、免疫共沉淀（COIP） |
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附：Anti-DYKDDDDK（Flag）IP/Co-IP Kit （Cat#20765ES）、Anti-HA IP/Co-IP kit（Cat#20766ES）
Anti-DYKDDDDK（Flag）IP/Co-IP Kit （Flag標(biāo)簽蛋白免疫（共）沉淀試劑盒）、Anti-HA IP/Co-IP kit (HA標(biāo)簽蛋白免疫（共）沉淀試劑盒)是一種通過(guò)高質(zhì)量的Anti-Flag免疫磁珠、Anti-HA免疫磁珠，進(jìn)行Flag、HA標(biāo)簽融合蛋白免疫沉淀或免疫共沉淀的試劑盒。試劑盒包含高質(zhì)量的Anti-Flag免疫磁珠（Cat#20565ES）、Anti-HA免疫磁珠（Cat#20566ES）及經(jīng)過(guò)優(yōu)化驗(yàn)證的免疫沉淀必要試劑（IP裂解液、蛋白酶抑制劑，上樣緩沖液，平衡、洗脫、中和緩沖液），每個(gè)反應(yīng)使用25 uL磁珠，試劑盒所含試劑足夠完成40個(gè)反應(yīng)。
產(chǎn)品性能
翌圣Anti-Flag親和純化凝膠(20584ES)與國(guó)外進(jìn)口品牌S*純化對(duì)比測(cè)試
圖3.Yeasen（a) PK進(jìn)口品牌S*(b) Anti-Flag凝膠對(duì)比測(cè)試跑膠圖
M：蛋白Marker；1：Flag-N、M、C蛋白柱前原液；2：Flag-N、M、C蛋白柱后穿透；3：洗脫（pH2.7洗脫）；4：洗脫（pH12洗脫）
下圖中箭頭所示為目的標(biāo)簽蛋白，磁珠直接煮沸
圖4. Anti-HA純化磁珠純化HA標(biāo)簽蛋白效果圖
圖中箭頭所示為目的標(biāo)簽蛋白，磁珠直接煮沸從上到下的三條帶依次為BSA、抗體重鏈和抗體輕鏈
圖5. Anti-Flag免疫磁珠純化flag標(biāo)簽蛋白效果圖
1: 含F(xiàn)lag標(biāo)簽蛋白的大腸桿菌裂解液 10 μL； 2: 含F(xiàn)lag標(biāo)簽蛋白的大腸桿菌裂解液與磁珠孵育后的上清 10 μL；
3: 含F(xiàn)lag標(biāo)簽蛋白的Anti-flag MagBeads直接煮沸 10 μL；4: Anti-Flag MagBeads直接煮沸；5：Marker
圖6. Anti-GFP免疫磁珠純化GFP標(biāo)簽蛋白效果圖
1: 含GFP標(biāo)簽蛋白的大腸桿菌裂解液10 μL； 2: 含GFP標(biāo)簽蛋白的大腸桿菌裂解液與磁珠孵育后的上清10 μL；
3: 含GFP標(biāo)簽蛋白的Anti-GFP MagBeads直接煮沸 10 μL；4: Anti-GFP MagBeads直接煮沸；5：Marker
產(chǎn)品信息
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產(chǎn)品名稱 |
貨號(hào) |
規(guī)格 |
目錄價(jià)/元 |
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Anti-DYKDDDDK（Flag）Affinity Gel Anti-Flag親和純化凝膠 |
1 mL/5 mL/ 25 mL |
1715/4415/18415 |
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Anti-HA Affinity Gel Anti-HA親和純化凝膠 |
1 mL/5 mL/ 25 mL |
3815/12815/52815 |
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Anti-Myc Affinity Gel Anti-Myc親和純化凝膠 |
1 mL/5 mL/ 25 mL |
3815/12815/52815 |
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Anti-DYKDDDDK（Flag）MagAgarose Beads Anti-Flag純化磁珠 |
1 mL/5 mL |
1115/4625 |
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Anti-HA MagAgarose Beads Anti-HA純化磁珠 |
1 mL/5 mL |
1115/4625 | |
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Anti-Myc MagAgarose Beads Anti-Myc純化磁珠 |
1 mL/5 mL |
1115/4625 |
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Anti-GFP MagBeads Anti-GFP免疫磁珠 |
1 mL/5 mL |
2485/9985 |
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Anti-DYKDDDDK（Flag）MagBeads Anti-Flag免疫磁珠 |
1 mL/5 mL |
1655/6655 |
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Anti-HA MagBeads Anti-HA免疫磁珠 |
1 mL/5 mL |
1655/6655 |
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Anti-Myc MagBeads Anti-Myc免疫磁珠 |
1 mL/5 mL |
1655/6655 |
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Anti-DYKDDDDK（Flag）IP/Co-IP Kit Flag標(biāo)簽蛋白免疫(共)沉淀試劑盒 |
40 T |
2255 |
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Anti-HA IP/Co-IP Kit HA標(biāo)簽蛋白免疫(共)沉淀試劑盒 |
40 T |
2255 |
