隨著國家發(fā)改委《“十四五”生物經(jīng)濟(jì)發(fā)展規(guī)劃》的發(fā)布，讓生物技術(shù)賽道更加的火熱。高通量測序技術(shù)作為生物技術(shù)中的高精尖技術(shù)，在生殖遺傳、產(chǎn)前篩查、腫瘤伴隨診斷、腫瘤早篩、心血管疾病用藥與篩查、病原微生物檢測應(yīng)用越來越廣泛。

而文庫構(gòu)建環(huán)節(jié)作為高通量測序整個環(huán)節(jié)中的重要一環(huán)，對測序結(jié)果的質(zhì)量起到?jīng)Q定性的作用，片段化酶酶切的效果、片段加A的能力、接頭連接的效率、文庫擴(kuò)增的保真性，最終都決定了測序下機(jī)數(shù)據(jù)質(zhì)量，影響了報(bào)告結(jié)果的準(zhǔn)確性。正是因?yàn)槟[瘤用藥等應(yīng)用在終端客戶使用的普遍性，使得對產(chǎn)品的價格、報(bào)告周期、質(zhì)量的要求越來越高。

翌圣可根據(jù)客戶不同的應(yīng)用場景，不同的技術(shù)平臺，不同的樣本類型，精準(zhǔn)為客戶提供建庫方案。對于腫瘤伴隨診斷服務(wù)提供商，翌圣可為所有illumina平臺和MGI平臺提供相應(yīng)的建庫產(chǎn)品。腫瘤伴隨診斷實(shí)驗(yàn)所用到的樣本類型種類繁多：新鮮的手術(shù)組織、穿刺活檢組織，石蠟包埋固定的手術(shù)組織、穿刺活檢組織，血液gDNA，血液游離DNA，胸腹水沉渣DNA，胸腹水游離DNA等樣本類型。根據(jù)不同的樣本類型，選擇不同的建庫方式。

一、 機(jī)械法文庫制備方案

機(jī)械法建庫試劑盒可針對經(jīng)過超聲波片段化的DNA，或者是血液游離DNA或者降解度較高的FFPE樣本DNA來建庫。翌圣Ultima Pro類全能型建庫試劑盒（CAT#12197）可滿足以上樣本類型的建庫需求，本產(chǎn)品采用高質(zhì)量的酶學(xué)組成，在前一代建庫試劑盒的基礎(chǔ)上，改進(jìn)了DNA片段末端修復(fù)和加A效率，同時改善了接頭連接效率。本試劑盒采用新型的高保真酶，顯著提高擴(kuò)增均一性和保真性。本試劑盒模板投入量可兼容100 pg-1000 ng所有DNA樣本。

較高的文庫產(chǎn)出：

以2種不同的cfDNA樣本為模板，投入量為5ng，擴(kuò)增循環(huán)數(shù)12，比較文庫產(chǎn)出以及測序數(shù)據(jù)基礎(chǔ)質(zhì)量。

與競品試劑盒相比，12197測序數(shù)據(jù)表現(xiàn)均一，Duplicate較低、mapping rate較高，結(jié)構(gòu)變異更少，Mismatch更少。

二、 酶切法文庫制備方案

翌圣OnePot系列酶切建庫試劑盒是新一代建庫試劑盒（CAT#12205），與傳統(tǒng)的機(jī)械建庫法比較，酶切法建庫擺脫了繁瑣的超聲過程，同時簡化了操作流程。本品采用高質(zhì)量的片段化酶，將片段化模塊與末端修復(fù)模塊合二為一，極大的降低了建庫的時間和成本。本試劑盒具有優(yōu)秀的文庫轉(zhuǎn)化率，可應(yīng)用于腫瘤伴隨診斷的FFPE樣本、gDNA樣本等各種樣本類型500pg-1ug起始模板投入量的酶切建庫。同時，翌圣可為客戶專業(yè)定制匹配自動化建庫流程的建庫試劑，提供全套解決方案，讓高通量測序技術(shù)在基因檢測上不再難！

產(chǎn)品優(yōu)勢：

試劑盒性能展示：

1. 高效穩(wěn)定的片段化效果

●以Human Blood gDNA為模板，以不同的投入量（20ng~1μg）使用12205酶切12min，酶切產(chǎn)物純化，進(jìn)行2100質(zhì)控。結(jié)果如下圖所示：

● 用人gDNA NA12878樣本，Input DNA: 200 ng，酶切時間：8/10/12/14/16 min，用Agilent 2100質(zhì)檢

結(jié)果如下圖所示：

綜上結(jié)果：片段化酶的酶切效果不會受模板投入量的影響，只與酶切時間相關(guān)。

2. 酶切偏好性更低

從上圖中可以看出，與競品相比，翌圣片段化酶的片段偏好性與競品一致。

3. 超高的文庫擴(kuò)增保真性

從Lambda DNA全基因組建庫測序分析，結(jié)果顯示：Canace Pro保真性顯著優(yōu)于競品的結(jié)果

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