產(chǎn)品簡(jiǎn)介
Heparin Agarose 6FF肝素親和純化介質(zhì)是將肝素通過(guò)共價(jià)結(jié)合到交聯(lián)瓊脂糖基質(zhì)而得到的一類(lèi)親和層析介質(zhì)。利用肝素與蛋白質(zhì)的相互作用，選擇性結(jié)合目的蛋白。
純化原理
肝素是一種高度硫酸化的多糖。肝素的結(jié)構(gòu)中大量存在的磺酸基和乙酸基讓肝素成為已知酸性（電負(fù)性）最強(qiáng)的物質(zhì)之一，也使肝素可以與其他帶正電的基團(tuán)形成離子鍵，發(fā)揮陽(yáng)離子交換作用；葡萄糖胺骨架中的仲氨基也可以與其他物質(zhì)形成氫鍵。兩種作用力是肝素與肝素結(jié)合蛋白親和作用所必須的。由于肝素與蛋白質(zhì)相互作用以靜電力為主，這為肝素親和層析的使用帶來(lái)便利，一般情況下通過(guò)改變緩沖液中的鹽濃度即可實(shí)現(xiàn)目的蛋白的結(jié)合、清洗和洗脫。
產(chǎn)品應(yīng)用
與一般層析介質(zhì)的不同之處在于，肝素選擇性結(jié)合的蛋白種類(lèi)多種多樣，因此廣泛應(yīng)用于不同蛋白質(zhì)及病毒的純化過(guò)程。
產(chǎn)品性質(zhì)
產(chǎn)品測(cè)試
以DNA聚合酶的純化為例，實(shí)驗(yàn)步驟如下表：
表1.DNA聚合酶純化實(shí)驗(yàn)步驟
圖1. Heparin Agarose 6FF層析圖譜
圖2. Heparin Agarose 6FF純化結(jié)果電泳圖洗脫峰A4-A5純度大于95%
表2.競(jìng)品回收率對(duì)比圖
注意事項(xiàng)
肝素本身在低 pH 不穩(wěn)定，因此使用時(shí)應(yīng)該避免 pH＜4 的條件。
避免使用離子型去污劑。
用后處理使用 2 M NaCl 清洗離子結(jié)合蛋白，可以使用 6 M 鹽酸胍或 8 M 尿素清洗沉淀或變性蛋白，使用非離子去污劑清洗疏水結(jié)合蛋白。
推薦的CIP條件為 4 CV 的 0.1 M NaOH 處理 1-2 h。
產(chǎn)品訂購(gòu)
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產(chǎn)品名稱(chēng) |
產(chǎn)品編號(hào) |
規(guī)格 |
價(jià)格（元） |
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20493ES08 |
5 mL |
600 |
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20493ES25 |
25 mL |
2500 |
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20493ES60 |
100 mL |
7500 |
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20493ES72 |
250 mL |
18000 |
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