Protein A、Protein G、Protein L背景介紹

Protein A、Protein G是最常應(yīng)用于抗體親和純化和免疫沉淀的蛋白。將Protein A、G分別固定在不同的介質(zhì)上，或同時將Protein A、G共價偶聯(lián)到介質(zhì)表面，是從腹水、細(xì)胞培養(yǎng)物上清和血清中分離IgG和IgG亞家族的有效工具。

Protein A和Protein G純化IgG和IgG亞家族的基礎(chǔ)是二者對IgG-類型的多克隆抗體和單克隆抗體具有很高的特異性親和力。

Protein L源于細(xì)菌，能更廣泛地結(jié)合各種類型以及亞類的免疫球蛋白，包括所有類型的IgG和單鏈可變區(qū)(ScFv)以及Fab片段。該蛋白只與抗體的kappa鏈結(jié)合而不會影響抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)，這一特性使其與蛋白A或蛋白G相比，能更廣泛地結(jié)合各種來源及亞類的抗體。

表1. Protein A、G、L的抗體親和性差異分析

附表1是關(guān)于Protein A和Protein G對于不同的免疫球蛋白相對結(jié)合力的比較，可用于預(yù)測Protein A或Protein G作為親和介質(zhì)時的選用指導(dǎo)。對于來自特別物種IgG的最佳結(jié)合條件，應(yīng)該查閱近期的文獻(xiàn)，獲得最有價值的信息。

翌圣抗體親和純化產(chǎn)品選擇指南

親和純化是一種具有可逆反應(yīng)的生化分離純化技術(shù)，如抗原與抗體。適用于從成分復(fù)雜且雜質(zhì)含量遠(yuǎn)大于目標(biāo)物的混合物中提純目標(biāo)物。如圖2所示，首先填料與介質(zhì)偶聯(lián)，結(jié)合形成具有特異親和性的分離介質(zhì)，再向柱子中注入樣本，配體選擇性的吸附目標(biāo)物質(zhì)，平衡液洗雜，最終用洗脫液將目標(biāo)物質(zhì)進(jìn)行洗脫。

翌圣抗體親和純化類產(chǎn)品，以基因改造后的Protein A、Protein G、Protein A/G、Protein L為原料，通過不同化學(xué)方法將其定向、高效的偶聯(lián)到瓊脂糖基質(zhì)上或磁珠表面，不僅降低了蛋白的非特異性結(jié)合、實(shí)現(xiàn)了介質(zhì)較高的抗體載量，同時也獲得了適用于不同純化要求的抗體純化產(chǎn)品，涵蓋不同類型填料樹脂、自動層析預(yù)裝柱、免疫磁珠，方便使用手動或自動化方式純化抗體蛋白質(zhì)。

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參考文獻(xiàn)

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附表1. 蛋白A、G對不同物種Ig的結(jié)合能力比較