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      Nature|翌圣克隆試劑盒助力揭示核仁超微精細(xì)結(jié)構(gòu)與功能

      分子克隆技術(shù)發(fā)展至今,從最經(jīng)典的酶切酶連法到簡(jiǎn)便、快速的同源重組法,廣受科研小伙伴的青睞!翌圣一步法快速克隆試劑盒(Cat#10911、10922)自上市以來(lái),受到了眾多小伙伴的支持!好評(píng)如潮!
       
      小翌了解到使用翌圣一步法快速克隆試劑盒的最高分文章發(fā)表在Nature(IF 69.504)期刊,其余多篇發(fā)表在Nucleic acids research (IF 19.16)、Nature cell biology(IF 28.824)、Cell Metabolism(IF 31.373)。
       
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      Nucleolar URB1 ensures 3′ ETS rRNA removal to prevent exosome surveillance

      研究團(tuán)隊(duì):中國(guó)科學(xué)院 陳玲玲研究組

      發(fā)表期刊:Nature

      影響因子:69.504

      發(fā)表日期:2023年3月8日

      研究背景:核仁通常表現(xiàn)為單一或多個(gè)勻質(zhì)的球形小體,是真核細(xì)胞間期核中最顯著的結(jié)構(gòu)。核仁的主要功能是進(jìn)行核糖體與RNA(rRNA)的合成。它包含數(shù)百種蛋白質(zhì),大多數(shù)核仁蛋白質(zhì)的精確定位及其如何參與pre-rRNA加工等問(wèn)題尚不清楚。

      ?詳情參考

      URB1調(diào)控pre-rRNA 3’末端的折疊和加工(圖片來(lái)自原文)

       

      研究人員利用CRISPR/Cas9技術(shù)構(gòu)建雙色熒光標(biāo)記的細(xì)胞系,利用高分辨率活細(xì)胞顯微鏡,通過(guò)篩選200個(gè)候選核仁蛋白,發(fā)現(xiàn)了12種蛋白向致密纖維組分外圍富集。通過(guò)敲除URB1的斑馬魚等動(dòng)物模型,發(fā)現(xiàn)12種蛋白中的關(guān)鍵蛋白URB1對(duì)維持該區(qū)域的完整性、錨定pre-rRNA 3’端及正確折疊加工起到至關(guān)重要的作用。該工作全面展示了核仁精細(xì)結(jié)構(gòu),關(guān)鍵蛋白與pre-rRNA的協(xié)同加工來(lái)維持核仁穩(wěn)定,為深入研究核仁蛋白質(zhì)提供了新的思路。

       

      涉及克隆產(chǎn)品

      (截圖來(lái)自原文)

       

       
      明星產(chǎn)品推薦
       
      翌圣生物一步法快速克隆試劑盒是一種利用同源重組的原理,進(jìn)行無(wú)縫克隆的技術(shù)。該技術(shù)無(wú)需考慮酶切位點(diǎn),將PCR產(chǎn)物定向克隆至任何載體的任何位點(diǎn),可高效克隆50 bp-10 kb片段。操作過(guò)程簡(jiǎn)單快速,只需50°C,20 min即可完成反應(yīng)。勁爆的是,多個(gè)片段也可以同時(shí)克隆哦!
       

      反饋1:中國(guó)科學(xué)院病毒所

       
      單片段連接:5033bp+1863bp
      圖1. 使用10922ES和競(jìng)品N*進(jìn)行單片段連接,陽(yáng)性率100%。
      A:競(jìng)品N*轉(zhuǎn)化平板。B:競(jìng)品N*重組轉(zhuǎn)化平板。C:10922ES轉(zhuǎn)化平板。D:10922ES轉(zhuǎn)化平板
       

      反饋2:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院油料作物研究所

       
      4片段連接:2853bp+2487bp+227bp+2137bp+331bp 
      圖2. 使用10922ES進(jìn)行4片段連接
      A:10922ES轉(zhuǎn)化平板圖。B:線性化載體與插入片段電泳圖,M1為Yeasen DL5000;泳道1為片段A(2487 bp);泳道2、3為片段C(2137 bp);泳道4為線性化載體(2853 bp);泳道5為片段B(227 bp);泳道8為片段D(331bp)。C:陽(yáng)性克隆檢測(cè)電泳圖,M2為ATG10kb,PCR檢測(cè)大小為1883bp。

       

      反饋3:安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)

       
      單片段連接:8130bp+760bp
      圖3. 使用10922ES進(jìn)行單片段連接
      A:10922ES轉(zhuǎn)化平板圖。B:線性化載體電泳圖,M1為Yeasen GoldBand 1 kb DNA ladder,泳道1、2、3為載體用EcoRI線性化。C:插入片段電泳圖,M2為 DL2000 Plus DNA Marker,泳道1、2均為PCR產(chǎn)物。D:酶切檢測(cè)重組載體,M1為1 kb Marker,泳道1、2、3、4均為酶切鑒定陽(yáng)性克隆。
       
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      產(chǎn)品定位

      產(chǎn)品名稱

      產(chǎn)品貨號(hào)

      規(guī)格

      單片段一步克隆

      Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit一步法快速克隆試劑盒

      10911ES20

      20T

      1-5片段一步克隆

      Hieff Clone® Plus Multi One Step Cloning Kit 多片段一步法快速克隆試劑盒

      10912ES10

      10T

      1-6片段一步克隆

      Hieff Clone® Universal One Step Cloning Kit

      10922ES20

      20T

      替代TA連接克隆

      Hieff Clone® Zero TOPO-TA Cloning Kit 零背景TOPO-TA克隆試劑盒

      10907ES20

      20T

      Hieff Clone®  Zero TOPO-TA Simple Cloning Kit, MCS-Depleted

      零背景TOPO-TA克隆試劑盒(不含MCS多克隆酶切位點(diǎn))

      10908ES20

      20T

      替代平末端連接克隆

      Hieff Clone® Zero TOPO-Blunt Cloning Kit 零背景TOPO-Blunt平末端克隆試劑盒

      10909ES20

      20T

      Hieff Clone® Zero TOPO-Blunt Simple Cloning Kit

      零背景TOPO-Blunt平末端克隆試劑盒(不含MCS多克隆酶切位點(diǎn))

      10910ES20

      20T

      感受態(tài)

      TOP10 Chemically Competent Cell TOP10化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

      11801ES80

      10×100 μL

      DH5α Chemically Competent Cell DH5α 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

      11802ES80

      10×100 μL

      BL21 (DE3) Chemically Competent Cell BL21 (DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

      11804ES80

      10×100 μL

      高保真酶,83×Taq

      2×Hieff Canace® Plus PCR Master Mix (With Dye) 高保真酶預(yù)混液

      10154ES01

      100 μL

       
       

      400-6111-883