客戶反饋|翌圣同源重組克隆試劑盒助你一氣呵成，攻無(wú)不“克”
載體構(gòu)建技術(shù)是分子生物學(xué)和基因工程研究中的常用技術(shù)之一，用傳統(tǒng)的方法構(gòu)建多片段連接的復(fù)雜載體時(shí)，通常需要構(gòu)建多個(gè)中間載體，多次的連接轉(zhuǎn)化可謂費(fèi)時(shí)費(fèi)力。同源重組克隆作為一種新的克隆技術(shù)，可以在質(zhì)粒的任何位點(diǎn)上進(jìn)行一個(gè)或多個(gè)目的片段的插入，只需要一步重組即可完成載體的構(gòu)建，極大地提高了工作效率。
同源重組克隆原理如下：在目的片段的兩端引入同源臂后，重組酶5’端核酸外切酶活性將線性化載體和目的片段DNA的5'端降解，產(chǎn)生的單鏈末端兩兩配對(duì)；隨后伴隨著溫度的上升，重組酶的DNA聚合酶活性針對(duì)缺失的堿基進(jìn)行補(bǔ)充和添加；最后再由重組酶的連接活性將堿基間的缺口修復(fù)，得到一個(gè)完整的雙鏈DNA。
翌圣生物匠心研發(fā)的同源重組克隆試劑盒自上市以來(lái)，廣受好評(píng)。好的產(chǎn)品，從來(lái)不是偶然，好的口碑來(lái)自大眾的反饋，接下來(lái)就由小翌帶大家一起看看客戶的的體驗(yàn)反饋吧！
Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit (Cat# 10911)
反饋1：山東師范大學(xué)-1300 bp單片段克隆
圖1. 使用Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit進(jìn)行1300 bp單片段克隆。A：插入目的片段DNA電泳；B：實(shí)驗(yàn)組克隆生長(zhǎng)狀況；C：菌落PCR檢測(cè)陽(yáng)性克?。l帶大小均正確）。
反饋2：浙江大學(xué)-400 bp單片段克隆
圖2. 使用Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit進(jìn)行400 bp單片段克隆。A：線性化載體質(zhì)粒電泳（所用Marker為Marker 8000）；B：插入目的片段DNA電泳（所用Marker為Marker 5000）；C：實(shí)驗(yàn)組克隆生長(zhǎng)狀況；D：菌落PCR檢測(cè)陽(yáng)性克隆（條帶大小均正確）。
反饋3：四川大學(xué)-2445 bp單片段克隆
圖3. 使用Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit進(jìn)行2445 bp單片段克隆。A：pFastBac I質(zhì)粒（帶信號(hào)肽）電泳；B：pFastBac I質(zhì)粒（帶信號(hào)肽）酶切后的產(chǎn)物大?。?/span>EcoR I和Hind Ⅲ）；C：實(shí)驗(yàn)組克隆生長(zhǎng)情況；D：菌落PCR檢測(cè)陽(yáng)性克?。l帶大小均正確）。
反饋4：天津中醫(yī)藥大學(xué)-2290 bp單片段克隆
圖4. 使用Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit進(jìn)行2290 bp單片段克隆。A：line1為酶切載體片段，line2為PCR擴(kuò)增目的片段；B：實(shí)驗(yàn)組克隆生長(zhǎng)情況；C：菌落PCR驗(yàn)證陽(yáng)性克隆。
Hieff Clone® Universal One Step Cloning Kit (Cat# 10922 )
反饋1：植物研究所-975 bp單片段克隆
圖5. 使用Hieff Clone® Universal One Step Cloning Kit進(jìn)行975 bp單片段克隆。A：線性化載體電泳；B：插入目的片段電泳；C：上圖為實(shí)驗(yàn)組克隆生長(zhǎng)狀況，下圖為陽(yáng)性對(duì)照組；D：菌落PCR驗(yàn)證陽(yáng)性克隆。
反饋2：武漢大學(xué)-1600 bp+1700 bp兩片段克隆
圖6. 使用Hieff Clone® Universal One Step Cloning Kit進(jìn)行1600 bp+1700bp兩片段克隆。A：插入目的片段電泳，1為1.6 Kb目的條帶，2為1.7 Kb目的條帶；B：線性化質(zhì)粒電泳；C：實(shí)驗(yàn)組克隆生長(zhǎng)狀況；D：PCR鑒定陽(yáng)性克隆。
反饋3：清華大學(xué)-3600 bp單片段克隆
圖7. 使用Hieff Clone® Universal One Step Cloning Kit進(jìn)行3600 bp單片段克隆。A：插入目的片段電泳；B：control是產(chǎn)品中的對(duì)照組轉(zhuǎn)化情況，BD為實(shí)驗(yàn)組克隆生長(zhǎng)情況；C：菌落PCR驗(yàn)證陽(yáng)性克隆。
反饋4：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)-兩片段和四片段重組克隆
圖8. 使用Hieff Clone® Universal One Step Cloning Kit進(jìn)行兩片段和四片段克隆。A：1-9號(hào)為PCR產(chǎn)物，6號(hào)為線性化的pACYC177，7號(hào)為線性化的pBR322；B：片段大體系電泳圖；C：圖為涂板12 h后的菌落生長(zhǎng)情況，帶×號(hào)為驗(yàn)證DH5α活性，pA2代表兩片段重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化情況，pA4代表四片段重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化情況，pB2和pB4同理。D：PCR鑒定陽(yáng)性克?。╬A用2號(hào)和5號(hào)片段的引物，pB用4號(hào)和5號(hào)片段的引物）和酶切鑒定，兩種方法鑒定結(jié)果均正確。
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產(chǎn)品定位 |
產(chǎn)品名稱 |
產(chǎn)品貨號(hào) |
規(guī)格 |
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單片段一步克隆 |
10911ES20 |
20T |
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1-5片段一步克隆 |
10912ES10 |
10T |
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1-6片段一步克隆 |
Hieff Clone® Universal One Step Cloning Kit 通用型一步法快速克隆試劑盒 |
10922ES20 |
20T |
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替代TA連接克隆 |
10907ES20 |
20T |
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Hieff Clone® Zero TOPO-TA Simple Cloning Kit, MCS-Depleted 零背景TOPO-TA克隆試劑盒（不含MCS多克隆酶切位點(diǎn)） |
10908ES20 |
20T |
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替代平末端連接克隆 |
Hieff Clone® Zero TOPO-Blunt Cloning Kit 零背景TOPO-Blunt平末端克隆試劑盒 |
10909ES20 |
20T |
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Hieff Clone® Zero TOPO-Blunt Simple Cloning Kit 零背景TOPO-Blunt平末端克隆試劑盒（不含MCS多克隆酶切位點(diǎn)） |
10910ES20 |
20T |
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DNA克隆和質(zhì)粒擴(kuò)增 |
11801ES80 |
10×100 μL |
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11802ES80 |
10×100 μL |
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非病毒蛋白重組表達(dá) |
BL21 (DE3) Chemically Competent Cell BL21 (DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 |
11804ES80 |
10×100 μL |
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常規(guī)PCR擴(kuò)增 |
10102ES03 |
1mL |
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10157ES03 |
1mL |
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復(fù)雜DNA模板擴(kuò)增 |
10154ES03 |
1 mL |
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柱式法核酸提取 |
19001ES50 |
50T |
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MolPure® Endo-free Plasmid Mini Kit 無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒 |
19021ES50 |
50T |
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MolPure® Endo-free Plasmid Maxi Kit無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒大量提取試劑盒 |
19036ES10 |
10T |
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19101ES50 |
50T |
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19106ES50 |
50T |
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