產(chǎn)品描述
瓊脂糖(Agarose)是純化的線性半乳聚糖親水膠體,提取自瓊脂或者含瓊脂的海藻,結(jié)構(gòu)上是一種線性聚合物,由β-D-吡喃半乳糖(1-4)連接3,6-脫水α-L-吡喃半乳糖基構(gòu)成。作為一種凝膠試劑,常用于通過凝膠電泳或者印跡法(如Northern或Southern)來進(jìn)行日常核酸分析,也適用于蛋白應(yīng)用,如輻射狀免疫擴(kuò)散(RID)實(shí)驗(yàn)。
本品為3:1 瓊脂糖,與常規(guī)瓊脂糖相比,對(duì)PCR產(chǎn)物,小片段DNA(1000 bp以下)具有很高的分辨率。此外,還具有如下特點(diǎn):1)易溶解,膠液更清澈,可以配制高達(dá)5%的凝膠;2)很低的背景;3)品質(zhì)穩(wěn)定等。
瓊脂糖的基本參數(shù),包括:
1)硫酸鹽含量(sulfate content)——純度指標(biāo),因?yàn)榱蛩岣谴嬖诃傊莾?nèi)的主要離子基團(tuán);
2)凝膠強(qiáng)度(gel strength)——施加于凝膠使之?dāng)嗔训耐饬Γ?/span>
3)膠凝點(diǎn)(Gel point)——水溶性瓊脂糖溶液冷卻后形成凝膠時(shí)的溫度。液體向凝膠轉(zhuǎn)化的過程中,瓊脂糖溶液具有滯后性,因此,膠凝點(diǎn)不等同于膠熔點(diǎn)。
4)電滲(EEO)——液體穿透凝膠的一種電動(dòng)運(yùn)動(dòng)。瓊脂糖凝膠內(nèi)的陰離子基團(tuán)吸附在基質(zhì)上不會(huì)發(fā)生遷移,但是解離的陽離子就會(huì)朝負(fù)極遷移,從而產(chǎn)生電滲。由于生物聚合物的電泳遷移通常是朝負(fù)極運(yùn)動(dòng),則EEO產(chǎn)生的內(nèi)部對(duì)流會(huì)干擾分離效率。
產(chǎn)品性質(zhì)
外觀(Appearance) |
白色粉末 |
凝膠強(qiáng)度(Gel Strength) |
≥650g/cm2(1.5% gel) |
凝膠溫度(Gel Point) |
≤36℃(1.5% gel) |
融膠溫度(Melting Point) |
≤80℃(1.5% gel) |
電滲值(EEO, -mr) |
≤0.10 |
外觀(Appearance) |
無色清澈膠液 |
硫酸鹽(Sulfate, %) |
≤0.10% |
水分(Moisture) |
≤10% |
灰分(Ash Content) |
≤0.5% |
DNA酶(DNase) |
Not detected |
RNA酶(RNase) |
Not detected |
蛋白酶(Protease) |
Not detected |
核酸內(nèi)切酶(Endonuclease) |
Not detected |
運(yùn)輸和保存方法
室溫運(yùn)輸。室溫干燥保存。有效期5年。
使用方法
1)配制適量電泳及制膠用的緩沖液(根據(jù)電泳需要,配制合適濃度的電泳及制膠緩沖液),倒入合適三角瓶中。
【注】:用于電泳的緩沖液和用于制膠的緩沖液必須是相同的。
2)根據(jù)制膠量及凝膠濃度,加入準(zhǔn)確稱量的瓊脂糖粉(總液體量不宜超過三角錐瓶的50%容量)。
3)在微波爐中加熱溶解瓊脂糖,設(shè)置中火加熱至沸騰,保持膠液沸騰約30 Sec,戴上防熱手套,移開三角錐瓶,小心搖動(dòng)三角錐瓶,重懸未溶解顆粒,再次用高火加熱1 min(或加熱直至瓊脂糖完全溶解)。請(qǐng)戴上防熱手套,小心搖動(dòng)三角錐瓶,使瓊脂糖膠液充分均勻。
【注】:必須保證瓊脂糖充分完全溶解,此時(shí)瓊脂糖膠液清澈,否則,會(huì)造成電泳圖像模糊不清。加熱時(shí)如膠液劇烈沸騰發(fā)泡,停止加熱。微波爐中加熱時(shí)間不宜過長(zhǎng)。
4)使溶液冷卻至60℃左右,如需要可在此時(shí)加入溴化乙錠(EB)溶液使其終濃度為0.5 µg/ml,并充分混勻。
【注】:溴化乙錠是一種致癌物質(zhì)。使用含有溴化乙錠的溶液時(shí),請(qǐng)戴用手套。建議使用我司提供的EB無毒替代品(YeaRed 核酸染料,Cat# 10202),使用時(shí)僅需用制膠緩沖液稀釋至1×工作液即可。
5)將瓊脂糖溶液倒入制膠模具中,在適當(dāng)位置處插上梳子。凝膠厚度一般在3-5 mm之間。
6)在室溫下使膠凝固(大約30 min-1 h),然后放置于電泳槽中進(jìn)行電泳。
【注】:凝膠不立即使用時(shí),請(qǐng)用保鮮膜將凝膠包好后在4℃下保存,一般可保存 2~5 天。
瓊脂糖濃度與DNA分離范圍
線性DNA片段大小(bp) |
10-100 bp |
100-500 bp |
500-1000 bp |
瓊脂糖濃度(%),1×TAE Buffer |
6.0 |
4.0 |
3.0 |
瓊脂糖濃度(%),1×TBE Buffer |
5.0 |
3.0 |
2.0 |
注意事項(xiàng)
1)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2)本產(chǎn)品僅作科研用途!
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 |
貨號(hào) |
規(guī)格 |
10201ES03 |
1 mL |
|
10202ES76 |
500 μL |
|
10204ES76 |
500 μL |
|
10208ES60/76 |
100/500 g |
|
10214ES08/25 |
5/25 g |
|
10501ES60/80 |
100/1000 T |
HB210824
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