2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix是即用型2× 預(yù)混合溶液，包含Hieff Canace® AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase，dNTPs以及優(yōu)化的緩沖體系，擴增產(chǎn)物為平末端。2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix具有快速簡便、靈敏度高、特異性強、穩(wěn)定性好等優(yōu)點，反應(yīng)體系只需加入引物和模板即可。另外，該產(chǎn)品還含有特異保護劑，使得預(yù)混液反復(fù)凍融后仍可維持穩(wěn)定活性。

 

儲存條件

-25~-15℃保存，有效期1年。

 

使用說明

1. 推薦PCR反應(yīng)體系

組分	體積 （μL）	終濃度
2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix*	25	1×
模板**	x	-
正向引物F（10 μM）***	2	0.4 μM
反向引物R（10 μM）	2	0.4 μM
ddH2O	Up to 50	-

表1 PCR反應(yīng)體系

*在1× 預(yù)混液含有2 mM Mg²⁺和200 μM的dNTPs。

**推薦范圍10-200 ng；cDNA樣本上樣量范圍不超過反應(yīng)體系的1/10，推薦1-2.5 μL。

***PCR 反應(yīng)體系中引物終濃度的范圍為0.2-1 μM，推薦0.4 μM。

2. 反應(yīng)程序

循環(huán)步驟	溫度	時間	循環(huán)數(shù)
預(yù)變性	98℃	30 sec	1
變性	98℃	10 sec	30-35
退火*	60℃	5 sec
延伸**	72℃	5-10 sec/kb
終延伸	72℃	2 min	1

表2 PCR反應(yīng)程序

*推薦溫度：60°C，也可根據(jù)需要，設(shè)立溫度梯度去摸索引物退火的最適溫度。推薦退火時間設(shè)置為5 sec，可以在5-30 sec內(nèi)調(diào)節(jié)。退火時間太長可能導(dǎo)致擴增產(chǎn)物在膠上呈彌散狀。

**延伸時間：推薦5 sec/kb，也可根據(jù)需要，適當(dāng)延長至10 sec/kb。

 

注意事項

1.為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

2.本產(chǎn)品僅作科研用途！

 

Ver.CN20230707