化學(xué)轉(zhuǎn)染方法是生物醫(yī)學(xué)研究中最常用的轉(zhuǎn)染方法。轉(zhuǎn)染試劑已經(jīng)成為研究和控制真核細胞基因功能的常規(guī)試劑,在基因功能研究、基因表達調(diào)控、突變分析,以及基因治療、細胞治療、蛋白生產(chǎn)、疫苗生產(chǎn)等方面應(yīng)用廣泛。
圖1. 核酸轉(zhuǎn)染(源自《Advanced Materials》)
現(xiàn)在市面上轉(zhuǎn)染試劑種類繁多,質(zhì)量良莠不齊,如何選擇一款合適的轉(zhuǎn)染試劑會顯得比較棘手。在考慮合適的轉(zhuǎn)染試劑時,要考慮轉(zhuǎn)染的物質(zhì)(DNA、RNA、蛋白)以及要轉(zhuǎn)染的細胞特性。我們在往期的細胞轉(zhuǎn)染注意事項,你都get了嗎?(上)進行了初步的探討,也在細胞轉(zhuǎn)染注意事項,你都get了嗎?(下)一文中進一步從細胞類型與核酸類型這2個緯度進行了翌圣品牌轉(zhuǎn)染試劑的選擇區(qū)分。本期將對不同的轉(zhuǎn)染試劑進行詳細說明。
圖2. 脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)(源自Nature)
a. 最簡單的脂質(zhì)體,由磷脂雙分子層構(gòu)成的脂質(zhì)囊泡;
b. “隱身”脂質(zhì)體,通過PEG修飾實現(xiàn)長循環(huán);
c. 大多數(shù)陽離子脂質(zhì)體具有洋蔥樣結(jié)構(gòu),DNA夾在陽離子膜之間;
d. Kubitschke等人報道的新型脂質(zhì)體,由花瓶狀的脂質(zhì)分子(分子兩側(cè)有疏水鏈和親水鏈)組成雙分子層
Hieff TransTM脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑-40802ES
40802對標Lipofectamine 2000,操作簡便,適合血清存在的培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)染前后無需更換培養(yǎng)基,細胞仍保持很好的活性,經(jīng)濟實用,對大多數(shù)細胞均具有較高的轉(zhuǎn)染效率,價格低,具有很高的性價比。通常情況下對于24孔板轉(zhuǎn)染,每次用1.5 μL左右,則1 mL Hieff TransTM約可做660次轉(zhuǎn)染;對于6孔板,每次用6 μL左右,則1 mL Hieff TransTM約可做160次轉(zhuǎn)染。
圖3. Hieff transTM與Lipo2000在293T細胞轉(zhuǎn)染DNA效果圖(源自復(fù)旦大學(xué))
采用40802產(chǎn)品發(fā)表的文獻眾多,受到廣泛好評,應(yīng)用于各種研究方向,舉例可見IF55分!翌圣轉(zhuǎn)染試劑助力高分文章,根據(jù)2022年最新的SCI影響因子,華東理工大學(xué)生物工程學(xué)院楊弋團隊采用40802發(fā)表在《Nature Biotechnology》雜志的文章影響因子已達68.164。
在部分研究中,40802也用于慢病毒包裝,可見超燃!翌圣轉(zhuǎn)染試劑助力這個團隊連發(fā)3篇IF10+文章
磷酸鈣法細胞轉(zhuǎn)染試劑-40803ES
40803是在傳統(tǒng)磷酸鈣法的基礎(chǔ)上經(jīng)過特別優(yōu)化,不僅在轉(zhuǎn)染效率有了較大提高,且降低了細胞毒性,特別適合于293或293T細胞的轉(zhuǎn)染,對其他大多數(shù)常見細胞如Hela、CHO也具有較好的轉(zhuǎn)染效果,不僅適用于細胞的瞬時轉(zhuǎn)染,且適用于穩(wěn)轉(zhuǎn)株的篩選。
Polybrene(hexadimethrine bromide) 聚凝胺-40804ES
本產(chǎn)品目前廣泛用于逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)染,慢病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)染。
Hieff Trans™懸浮細胞專用脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑-40805ES
40805經(jīng)優(yōu)化專門用于懸浮細胞的轉(zhuǎn)染,且適用于DNA、RNA和寡核苷酸的轉(zhuǎn)染,對大多數(shù)真核細胞具有很高的轉(zhuǎn)染效率。
圖4. PEI轉(zhuǎn)染DNA示意圖(源自網(wǎng)絡(luò))
Hieff Trans™ siRNA/miRNA體外轉(zhuǎn)染試劑-40806ES
40806是一種非脂質(zhì)體PEI陽離子、兩性分子轉(zhuǎn)染試劑,為siRNA轉(zhuǎn)染到哺乳動物細胞中而開發(fā)。適用于siRNA和miRNA的轉(zhuǎn)染??稍趶V泛的細胞系中,實現(xiàn)1 nM的siRNA超過90%的表達效率。操作簡便,兼容血清和抗生素,無需更換培養(yǎng)基。
Hieff Trans™通用型轉(zhuǎn)染試劑-40808ES
40808對標Lipofectamine 3000,是我們最新推出的產(chǎn)品,基于新的納米技術(shù)研發(fā)的一款多用途、便捷高效的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑,適用于DNA、RNA和寡核苷酸的轉(zhuǎn)染,對包括原代細胞、神經(jīng)細胞在內(nèi)的難轉(zhuǎn)染細胞都具有較高的轉(zhuǎn)染效率。適合血清存在的培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)染前后無需更換培養(yǎng)基,細胞仍保持很好的活性。
圖5. Hieff TransTM通用型轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染試劑用EGFP表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細胞后的熒光圖。左圖為293T細胞,右圖為MCF-7細胞。
線性PEI轉(zhuǎn)染試劑MW25000-40815ES
40815是一種高電荷陽離子聚合物,非常容易結(jié)合帶負電荷的核酸分子,形成復(fù)合物,并使該復(fù)合物進入細胞中。該轉(zhuǎn)染試劑是一種瞬時轉(zhuǎn)染試劑,細胞毒性低,轉(zhuǎn)染效率高,在HEK293和CHO等細胞中基因表達效率較高。
線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(速溶型)MW40000-40816ES
PEI 40000與PEI 25000轉(zhuǎn)染試劑相比,具有很多優(yōu)點。包括:
1. PEI 40000較易溶解,可直接在水中溶解;
2. PEI 40000操作簡便,更易于使用,且比PEI 25000的轉(zhuǎn)染效果好;
3. PEI 25000含有4-11%的丙酰基殘留,其能阻止聚合物主鏈與DNA結(jié)合。相較于PEI 25000,PEI 40000是完全脫落的結(jié)構(gòu),因此其性能始終高效如一。
圖6. PEI40000轉(zhuǎn)染GFP表達質(zhì)粒到細胞后熒光圖。左圖為貼壁細胞Hek-293,轉(zhuǎn)染效率達到90%;右圖為懸浮細胞CHO-K1,轉(zhuǎn)染效率達到80%。
采用40816產(chǎn)品發(fā)表的文獻眾多,也受到廣泛好評,其中西湖大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院陶亮團隊發(fā)表在《Cell》(IF:66.85)的文章也采用了本產(chǎn)品,可見翌圣明星CP--轉(zhuǎn)染試劑與PCR產(chǎn)品又登《Cell》期刊
不同細胞系轉(zhuǎn)染效率通常不同,但細胞系的選擇通常是根據(jù)實驗的需要,因此在轉(zhuǎn)染實驗前應(yīng)根據(jù)實驗要求和細胞特性選擇適合的轉(zhuǎn)染試劑。罕見的細胞培養(yǎng),如神經(jīng)元和原代細胞等通常難以轉(zhuǎn)染,在轉(zhuǎn)染試劑選擇時候更需要慎重與預(yù)期的降低。
針對DNA轉(zhuǎn)染試劑與RNA轉(zhuǎn)染試劑,翌圣生物擁有雄厚的研發(fā)與生產(chǎn)團隊,不斷優(yōu)化配方,改良生產(chǎn)工藝,推出了多款以陽離子脂質(zhì)體與陽離子聚合物為基礎(chǔ)的產(chǎn)品,為廣大科研院校與企業(yè)提供全方位的產(chǎn)品,產(chǎn)品線覆蓋轉(zhuǎn)染試劑涉及的各個領(lǐng)域。
高分保障
目前翌圣轉(zhuǎn)染試劑系列的產(chǎn)品已經(jīng)榮登《Nature》《Cell》等多個頂級期刊,獲得科研大牛們認可!
以下僅展示部分論文:
科研路上會遇到各種磕磕絆絆,小翌助您過關(guān)斬將,每天都出好數(shù)據(jù)。
轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)品目錄
應(yīng)用場景 |
名稱 |
貨號 |
規(guī)格 |
價格(元) |
細胞類型:貼壁/懸浮 |
Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 |
40802ES01 |
100 μL |
168.00 |
40802ES02 |
0.5 mL |
738.00 |
||
40802ES03 |
1.0 mL |
1308.00 |
||
40802ES08 |
5×1mL |
4878.00 |
||
細胞類型:貼壁/懸浮 核酸類型:DNA |
40803ES70 |
200 T |
625.00 |
|
用途:病毒感染+DNA轉(zhuǎn)染 |
40804ES76 |
500 μL |
180.00 |
|
40804ES86 |
5×500 μL |
500.00 |
||
細胞類型:懸浮 |
Hieff TransTM Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent 懸浮細胞專用脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 |
40805ES01 |
100 μL |
228.00 |
40805ES02 |
0.5 mL |
948.00 |
||
40805ES03 |
1.0 mL |
1678.00 |
||
40805ES08 |
5×1 mL |
5268.00 |
||
細胞類型:貼壁/懸浮 核酸類型:siRNA、miRNA |
Hieff TransTM in vitro siRNA/miRNA Transfection Reagent siRNA/miRNA體外轉(zhuǎn)染試劑 |
40806ES01 |
0.1 mL |
372.00 |
40806ES02 |
0.5 mL |
1472.00 |
||
40806ES03 |
1.0 mL |
2572.00 |
||
細胞類型:貼壁/懸浮 核酸類型:DNA、siRNA、miRNA |
Hieff TransTM Universal Transfection Reagent Hieff TransTM通用型轉(zhuǎn)染試劑 |
40808ES02 |
0.5 mL |
1165.00 |
40808ES03 |
1 mL |
2065.00 |
||
40808ES08 |
5×1 mL |
7985.00 |
||
細胞類型:貼壁/懸浮 核酸類型:DNA |
Polyethylenimine Linear(PEI) MW25000 線性PEI轉(zhuǎn)染試劑MW25000 |
40815ES03 |
1 g |
1855.00 |
40815ES08 |
5×1 g |
7255.00 |
||
細胞類型:貼壁/懸浮 核酸類型:DNA |
Polyethylenimine Linear(PEI) MW40000(rapid lysis)線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(速溶型)MW40000 |
40816ES02 |
100 mg |
655.00 |
40816ES03 |
1 g |
1855.00 |
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