產(chǎn)品簡(jiǎn)介

 

Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus)是Hifair® Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus)的升級(jí)版，與前代Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase相比，本產(chǎn)品具有更強(qiáng)的殘留物耐抑制性、更快的逆轉(zhuǎn)錄速度以及更高的逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)量，適用于動(dòng)物、植物以及微生物RNA的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。其中的gDNA digester Mix -V2的殘留DNA消化能力大幅提升，可消化達(dá)1000 ng的DNA，更放心地避免了RNA模板中殘留的DNA污染，保證后續(xù)結(jié)果更加可靠。Hifair® AdvanceFast SuperMix含有逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)所需的所有組分，只需加入RNA模板和RNase-free H₂O即可進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，并同時(shí)終止gDNA digester的作用，保證cDNA的完整性。

本產(chǎn)品逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物適用于染料法和探針法qPCR，不適用于后續(xù)基因克隆等長(zhǎng)片段擴(kuò)增，如果需要，推薦翌圣Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit (Cat#11149ES、Cat#11150ES)進(jìn)行高效逆轉(zhuǎn)錄。

 

組分信息

 

組分編號(hào)	組分名稱	11155ES10	11155ES60
11155-A	Hifair® AdvanceFast SuperMix	60 μL	600 μL
11155-B	gDNA Digester Mix -V2	20 μL	200 μL
11155-C	RNase free H2O	200 μL	1 mL×2

 

儲(chǔ)存條件

 

-25℃ ~ -15℃保存，有效期1年。逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物可立即用于后續(xù)反應(yīng)，也可4℃短期保存，若需長(zhǎng)期保存，建議分裝后，于-20℃保存，避免反復(fù)凍融。

 

使用說明

 

一、若實(shí)驗(yàn)需要去除殘留DNA

1. DNA消化

在RNase-free離心管中配制如下混合液，用移液器輕輕吹打混勻。37℃孵育2 min。

組分	使用量
DNA Digester Mix -V2	2 μL
Total RNA	10 pg -2 μg*
or mRNA	10 pg-500 ng
RNase-free H2O	補(bǔ)水至 14 μL

* 建議Total RNA的投入量不超過2 μg。如果目的基因的表達(dá)豐度低，可增加投入量至最多5 μg Total RNA。

2. 反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)體系配制 (20 μL體系)

組分	使用量
上一步的反應(yīng)液	14 μL
Hifair® AdvanceFast SuperMix	6 μL

3. 反應(yīng)程序

溫度	時(shí)間
50℃	5 min
85℃	5 s

二、若實(shí)驗(yàn)無需去除殘留DNA

1. 反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)體系配制 (20 μL體系)

組分	使用量
Hifair® AdvanceFast SuperMix	6 μL
Total RNA	10 pg -2 μg*
or mRNA	10 pg-500 ng
RNase-free H2O	補(bǔ)水至 20 μL

* 建議Total RNA的投入量不超過2 μg。如果目的基因的表達(dá)豐度低，可增加投入量至最多5 μg Total RNA。

2. 反應(yīng)程序

溫度	時(shí)間
50℃	5 min
85℃	5 s

 

注意事項(xiàng)

 

1. 本產(chǎn)品僅作科研用途。

2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。

3. 加樣和配液步驟都盡量在冰上操作。

4. 每個(gè)組分在使用前都應(yīng)上下顛倒混勻，低速離心。

 

 

Ver.CN20241030