產(chǎn)品說明書
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產(chǎn)品簡介
考馬斯亮藍快速染色液（無需加熱，10×）是基于考馬斯亮藍染色法對蛋白質(zhì)進行染色而設(shè)計的，應(yīng)用于變性或非變性蛋
白電泳的凝膠染色，所用染料為考馬斯亮藍G250，不含甲醇，醋酸等有毒或有刺激性物質(zhì)。
本產(chǎn)品染色速度快，靈敏度高，無需加熱和脫色，5 min即可顯色質(zhì)量約100 ng的蛋白質(zhì)，30 min可檢測10 ng的蛋白
質(zhì)。凝膠染色會有藍綠色背景，用自來水沖洗掉殘余染色液即可觀察或拍照，若在旋轉(zhuǎn)搖床上用清水漂洗若干次，可將殘余的微弱背景徹底去除。
儲存條件
室溫保存，有效期1年。
使用說明
1.染色液配制：在裝有225 mL去離子水或蒸餾水的瓶中倒入本產(chǎn)品提供的25 mL染色原液，混勻后2~8℃放置，即為染色液工作液，使用前請上下顛倒混勻。
2. 剝下電泳完畢的SDS-PAGE，或native-PAGE膠，放在比凝膠稍大的塑料盒中。
3.加入25 mL染色液，緩慢搖床震蕩15 min，即可完成染色，染色30 min即可肉眼觀察到約10 ng的蛋白條帶，繼續(xù)染色可增加顏色深度，但不會增加靈敏度，染色2 h，即可達到最大染色深度。
4.倒去染色液，用自來水沖洗掉殘余染色液即可觀察或拍照，若在旋轉(zhuǎn)搖床上用清水漂洗若干次，可將殘余的微弱背景徹底去除，也可持續(xù)脫色，直至達到需要的背景。
注意事項
1.本產(chǎn)品使用考馬斯亮藍G250染色，此種染料是與蛋白質(zhì)中的堿性氨基酸結(jié)合，如果蛋白中沒有這類氨基酸，則無法使用
本產(chǎn)品對蛋白進行染色。
2.本產(chǎn)品如果長時間靜置，染料會慢慢向下沉降，在使用前請上下翻轉(zhuǎn)搖勻，保證染色效果一致。
3.為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
4.本產(chǎn)品僅作科研用途.
附錄1 蛋白染色選購表
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貨號 |
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名稱 |
考馬斯亮藍R250 |
考馬斯亮藍G250 |
考馬斯亮藍快速染色液(無需加熱) |
考馬斯亮藍快速染色液(8分鐘) |
蛋白質(zhì)銀染試劑盒 |
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原理 |
通過與蛋白質(zhì)內(nèi)的氨基和羧基基團間的靜電結(jié)合作用以及范德華力，考馬斯亮藍與蛋白質(zhì)形成強但非共價鍵連接的復(fù)合物。蛋白-染料復(fù)合物的形成穩(wěn)定染料攜帶的負(fù)電荷陰離子（如磺酸基），從而產(chǎn)生在膜上或者膠上肉眼可見的藍色。 |
銀離子在堿性 pH 環(huán)境下被還原成金屬銀，沉淀在蛋白質(zhì)的表面上顯色。 |
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應(yīng)用 |
電泳蛋白染色 |
蛋白質(zhì)含量測定 |
變性或非變性蛋白電泳的凝膠染色 |
變性或非變性蛋白電泳的凝膠染色及蛋白質(zhì)譜分析 |
檢測聚丙烯酰胺凝膠和瓊脂糖凝膠中的微量蛋白質(zhì) |
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優(yōu)點 |
染色靈敏度比氨基黑高5倍，可達0.1 µg蛋白。 |
條帶快速顯色，且背景顏色很淺不需要做褪色處理。操作快速、方便。 |
不含甲醇或乙酸等刺激成分，靈敏度高，無需加熱。 |
不含甲醇或乙酸等刺激成分，8-10分鐘即可完成PAGE膠上蛋白染色，無需脫色。 |
檢測靈敏度更高，可檢測到10-100 ng蛋白質(zhì)，比考馬斯亮藍染色法靈敏100多倍 |
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缺點 |
R250染色后需要脫色（有機試劑），才能進行蛋白條帶的觀察。 |
靈敏度低，檢測下限為0.5 µg。 |
染色時間約30 min-1 h，需要脫色（蒸餾水20-40 min） |
染色過程中必須加熱 |
操作較繁瑣 |
附錄2 蛋白電泳相關(guān)選購表
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實驗步驟 |
重點推薦試劑 |
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樣品制備 |
RIPA裂解液(強）（Cat#20101ES） |
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WB/IP裂解液 （Cat#20118ES） |
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細(xì)胞核/細(xì)胞漿蛋白抽提試劑盒（Cat#20126ES） |
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細(xì)胞膜/細(xì)胞漿蛋白抽提試劑盒（Cat#20127ES） |
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組織/細(xì)胞線粒體分離試劑盒 （Cat#20128ES） |
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磷酸酶抑制劑混合物（100×, 儲存液）（Cat#20109ES） |
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蛋白酶抑制劑Cocktail, EDTA-free,迷你型，片劑（Cat#20123ES） |
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蛋白酶抑制劑Cocktail, EDTA-free,100×DMSO儲液（Cat#20124ES） |
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去乙?；敢种苿?/font> Cocktail (100× in 70% DMSO)（Cat#20140ES） |
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蛋白定量 |
BCA蛋白濃度測定試劑盒(即用型)（Cat#20200ES） |
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BCA蛋白濃度測定試劑盒（增強型）（Cat#20201ES） |
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Bradford蛋白濃度測定試劑盒（Cat#20202ES） |
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蛋白電泳 |
5×SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液（Cat#20315ES） |
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PAGE凝膠快速制備試劑盒（Cat#20324ES-20327ES） |
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10×快速電泳液（Cat#36127ES） |
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高分辨率預(yù)制膠(Bis-Tris)（Cat#36259ES-36280ES） |
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三色預(yù)染蛋白Marker(8-180 kDa)（Cat#20350ES） |
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電泳相關(guān)儀器 |
EpPlus 增強型電泳儀電源（Cat#80311ES） |
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PET 2 兩塊膠蛋白迷你垂直電泳槽（Cat#80210ES） |
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PET 4 四塊膠蛋白迷你垂直電泳槽（Cat#80211ES） |
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BlotⅠ 迷你垂直轉(zhuǎn)印槽（Cat#80220ES） |
Ver.CN20241216
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