翌圣Hieff Clone^®系列克隆試劑盒，歷經(jīng)數(shù)次迭代與優(yōu)化，如今已囊括了從基礎(chǔ)克隆到高通量、高效能的一站式分子克隆系列解決方案，既含有用于載體構(gòu)建、基因突變等的通用型一步法快速克隆試劑盒，又含有用于測序、儲存DNA片段的通用型TOPO克隆試劑盒（兼容TA和平末端）。

翌圣分子克隆試劑盒操作步驟

翌圣Hieff Clone^®系列克隆試劑盒自2017年誕生至今，客戶好評不斷，每年均有客戶使用克隆試劑盒產(chǎn)品發(fā)表高分文章，包括Nature、Cell等多個頂級期刊，獲得科研大牛們認可！據(jù)不完全統(tǒng)計，截至2024年10月31日，翌圣克隆試劑產(chǎn)品多年來累計參與發(fā)表文章173篇文章，累計影響因子達1388.86，包括一步法快速克隆試劑盒和TOPO克隆試劑盒。

 

最新通用型產(chǎn)品推薦

產(chǎn)品分類	產(chǎn)品定位	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品貨號	規(guī)格
快速克隆試劑盒	1-7片段一步法定向連接，最快5分鐘完成重組反應(yīng)	Hieff Clone® Universal II One Step Cloning Kit	10923ES20/50	20 T/50 T
TOPO克隆試劑盒	兼容TA/平末端克隆	Hieff Clone® Universal Zero TOPO TA/Blunt Cloning Kit	10906ES08/20	5 T/20 T

 

通用型多片段一步法快速克隆試劑盒

小翌強烈推薦翌圣通用型多片段快速克隆試劑盒（Cat#10923ES），滿足6 μL小體系、10 ng低濃度載體與片段的連接，菌落數(shù)多，克隆陽性率高，客戶反饋效果好?。ㄓ掖辽暾堅囉? 試用裝申請）

 

一步法克隆與傳統(tǒng)酶切克隆方法的比較

方法	插入片段制備	酶切位點限制	通用性	連接時間	陽性率
一步法快速重組克隆技術(shù)	1步純化	無	★★★★★	最快5 min	高達95%
酶切連接克隆技術(shù)	2步純化	有	★★	過夜	不同基因差別大

 

優(yōu)勢性能

• 定向：可滿足1-7個DNA片段的定向無縫拼接
• 簡便：片段無需酶切，多片段連接一管內(nèi)即可完成
• 快速：最快5分鐘即可完成連接反應(yīng)
• 高效：克隆生長數(shù)多，克隆陽性率可達95%以上
• 廣泛：適用于任何載體，兼顧粘性和平末端；可用于多片段、點突變等的克隆
• 超長：載體片段連接長度可達25 kb以上

 

性能展示

• 單片段6 μL小體系高效重組

圖1. 在6 μL小體系非復(fù)蘇感受態(tài)下，連接10 ng低投入量單片段。結(jié)果顯示，10923ES性能好于競品，連接效率高，菌落數(shù)多，陽性率達100%。A-B：重組轉(zhuǎn)化平板。載體（10 kb）和插入片段（1 kb）摩爾比為1:2。C：插入片段PCR鑒定電泳圖，M：Yeasen 10505ES。

• 低濃度多片段高效重組

圖2. 分別連接低濃度的五片段和六片段。結(jié)果顯示，10923ES在低濃度下連接性能穩(wěn)定，菌落數(shù)多，陽性率100%。A-B：重組轉(zhuǎn)化平板。載體（11.6 kb）和插入片段（5片段共5.6 kb、六片段共7.6 kb）摩爾比為1:2。C-D：插入片段PCR鑒定電泳圖，M：Yeasen 10505ES，菌P長度2.6 kb。

 

客戶體驗反饋專區(qū)

01 高效、快速小體系單片段連接

圖3. Hieff Clone^® Universal II One Step Cloning Kit 10 μL小體系單片段連接和點突變克隆，陽性率100%。A&C：重組轉(zhuǎn)化平板。B：插入片段PCR鑒定電泳圖，泳道1-5分別為菌落1，菌落2，陰性對照，陽性對照（基因組作為模版），陽性對照（PCR純化片段作為模版）。D：插入片段PCR鑒定電泳圖。

 

02 高效、快速多片段連接

圖4. Hieff Clone^® Universal II One Step Cloning Kit多片段連接，陽性率100%。A&C：重組轉(zhuǎn)化平板。B：插入片段測序鑒定圖。D：插入片段PCR鑒定電泳圖。

 

通用型TOPO克隆試劑盒

小翌強烈推薦翌圣零背景通用型TOPO克隆試劑盒（Hieff Clone® Universal Zero TOPO TA/Blunt Cloning Kit，Cat#10906ES），利用新一代拓撲異構(gòu)酶(Topoisomerase)的原理，搭配高效的平末端化因子，僅需5 min快速克隆連接平末端產(chǎn)物和粘性末端產(chǎn)物，操作簡單，連接效率極高，克隆陽性率接近100%，客戶反饋效果好?。ㄓ掖辽暾堅囉? 試用裝申請）

 

TOPO克隆與傳統(tǒng)TA克隆方法的比較

方法	反應(yīng)時間	反應(yīng)溫度	體系組成	克隆陽性率	PCR產(chǎn)物
TOPO克隆技術(shù)	5 min	室溫	載體+插入片段	★★★★★	載體無需加“A”
傳統(tǒng)TA克隆技術(shù)	過夜	16℃	載體+插入片段+T4連接酶	★★	需要加“A”

 

優(yōu)勢性能

• 快速：僅需5分鐘即可完成連接反應(yīng)。
• 高效：無自連現(xiàn)象，陽性克隆率接近100%，無需設(shè)置藍白斑篩選。
• 連接片段：可連接150 bp-5 kb目的產(chǎn)物。
• 簡便：只需加入純化后目的片段即可。
• 兼容性廣：添加平末端因子，兼容TA克隆與平末端克隆。

 

性能展示

• 平末端/粘性末端片段高效連接

圖5. 相同體系下，分別投入200 bp粘性末端片段、1 kb粘性末端片段、2 kb平末端片段、4 kb平末端片段進行連接，結(jié)果顯示，Hieff Clone® Universal Zero TOPO TA/Blunt Cloning Kit試劑盒可以兼容粘性末端和平末端片段TOPO克隆。

 

客戶體驗反饋專區(qū)

• 平末端克隆高效連接

圖6. 3000 bp（120 ng）平末端片段連接，Hieff Clone® Universal Zero TOPO TA/Blunt Cloning Kit連接效率高，菌落數(shù)多，陽性率100%。A：連接轉(zhuǎn)化平板。B：插入片段PCR鑒定電泳圖。

• 粘性末端片段高效連接

圖7. 100 bp-500 bp（50 ng）粘性末端片段連接，與進口產(chǎn)品相比，10906ES連接效率高，菌落數(shù)多，4組樣品各挑10個單克隆，所有有效單克隆全為成功插入，陽性率100%。A&B：連接轉(zhuǎn)化平板。C：插入片段測序鑒定圖。

 

Hieff Clone^®系列克隆產(chǎn)品近年來助力高分文章成果

• 2017年
• 研究團隊：中國科學(xué)院分子細胞科學(xué)卓越創(chuàng)新中心陳玲玲課題組
• 發(fā)表期刊：Cell
• 影響因子：30.410
• 翌圣產(chǎn)品：Hieff Clone^® One Step Cloning Kit（該貨號已下架）

 

 

• 2018年
• 研究團隊：浙江大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程與儀器科學(xué)學(xué)院
• 發(fā)表期刊：Molecular Cell
• 影響因子：14.548
• 翌圣產(chǎn)品：Hieff Clone^® Plus One Step Cloning Kit（Cat#10911ES）

• 2019年
• 研究團隊：中國科學(xué)院分子細胞科學(xué)卓越創(chuàng)新中心
• 發(fā)表期刊：Cell
• 影響因子：36.216
• 翌圣產(chǎn)品：Hieff Clone^® One Step Cloning Kit（該貨號已下架）

 

• 2020年
• 研究團隊：北京工商大學(xué)植物資源研究與開發(fā)北京市重點實驗室
• 發(fā)表期刊：Nature Communications
• 影響因子：12.121
• 翌圣產(chǎn)品：Hieff Clone^® Plus Multi One Step Cloning Kit（Cat#10912ES）

• 2021年
• 研究團隊：中國科學(xué)院分子細胞科學(xué)卓越創(chuàng)新中心
• 發(fā)表期刊：Molecular Cell
• 影響因子：17.970
• 翌圣產(chǎn)品：Hieff Clone^® One Step Cloning Kit（該貨號已下架）

• 2022年
• 研究團隊：華東理工大學(xué)藥學(xué)院
• 發(fā)表期刊：Cell Metabolism
• 影響因子：31.373
• 翌圣產(chǎn)品：Hieff Clone^® Plus One Step Cloning Kit（Cat#10911ES）

• 2023年
• 研究團隊：中國科學(xué)院分子細胞科學(xué)卓越創(chuàng)新中心
• 發(fā)表期刊：Nature
• 影響因子：69.504
• 翌圣產(chǎn)品：Hieff Clone^® Plus One Step Cloning Kit（Cat#10911ES）

• 2024年
• 研究團隊：武漢大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院
• 發(fā)表期刊：Nature Microbiology
• 影響因子：30.964
• 翌圣產(chǎn)品：Hieff Clone^® Plus One Step Cloning Kit（Cat#10911ES）

 

相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品系列	產(chǎn)品定位	名稱	貨號	規(guī)格
一步法快速克隆試劑盒	單片段一步克隆，已發(fā)文章累計IF達到1000+	Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit一步法快速克隆試劑盒	10911ES20/50	20 T/50 T
	1-6片段一步克隆，最快5分鐘完成重組反應(yīng)	Hieff Clone® Universal One Step Cloning Kit通用型一步法快速克隆試劑盒	10922ES20/50	20 T/50 T
TOPO克隆試劑盒	替代TA連接克隆	Hieff Clone® Zero TOPO-TA Cloning Kit	10907ES20	20 T
	替代TA連接克?。ú缓?/font>MCS多克隆位點）	Hieff Clone® Zero TOPO-TA Simple Cloning Kit, MCS-Depleted	10908ES20	20 T
	替代平末端連接克隆	Hieff Clone® Zero TOPO-Blunt Cloning Kit	10909ES20	20 T
	替代平末端連接克隆（不含MCS多克隆位點）	Hieff Clone® Zero TOPO-Blunt Simple Cloning Kit, MCS-Depleted	10910ES20	20 T
感受態(tài)細胞	5 min快速完成感受態(tài)轉(zhuǎn)化	DH5α Fast Chemically Competent Cell F DH5α化學(xué)感受態(tài)	11803ES80	10×100 μL
	常規(guī)感受態(tài)細胞	TOP10 Chemically Competent Cell TOP10化學(xué)感受態(tài)細胞	11801ES80	10×100 μL
	常規(guī)感受態(tài)細胞	DH5α Chemically Competent Cell DH5α 化學(xué)感受態(tài)細胞	11802ES80	10×100 μL
	常規(guī)感受態(tài)細胞	BL21(DE3) Chemically Competent Cell BL21(DE3)化學(xué)感受態(tài)細胞	11804ES80	10×100 μL
高保真PCR	5s/kb，保真?？?/font>	2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye)	10164ES03/08	1 mL/5×1 mL
快速PCR	快速PCR升級，可菌P且適用復(fù)雜模板擴增	2×Hieff® Ultra-Rapid II HotStart PCR Master Mix	10167ES03/08	1 mL/5×1 mL