基質(zhì)膠是從富含胞外基質(zhì)蛋白EHS小鼠腫瘤中提取出的可溶性基底膜制備物，其主要成分由層粘連蛋白，Ⅳ型膠原，硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）和巢蛋白等組成，還包含生長因子如TGF-beta、EGF、IGF、FGF、組織纖溶酶原激活物和EHS腫瘤自身含有的其他生長因子。在1980年代中期由丹麥的 J. Engelbreth-Holm和Richard Swarm二者分別發(fā)現(xiàn)并具體描述基質(zhì)膠【1】，其主要生產(chǎn)過程是用鹽水提取/洗滌腫瘤勻漿后可溶性蛋白質(zhì)，再用溶劑萃取產(chǎn)物中不溶性復(fù)合物，在低溫下使用緩沖液進(jìn)行透析后獲得無色到淡黃色溶液。
圖.翌圣基質(zhì)膠產(chǎn)品特點
基質(zhì)膠為組織和細(xì)胞提供支撐、抗拉強度和支架支撐，也可以作為細(xì)胞粘附和運動的三維亞結(jié)構(gòu)以及生長因子、趨化因子和細(xì)胞因子的儲存庫，同時可用作為細(xì)胞形態(tài)發(fā)生和分化的信號等。
圖.基質(zhì)膠的應(yīng)用方向
以下結(jié)果采用的是翌圣生物開發(fā)生產(chǎn)的Ceturegel®基質(zhì)膠和高活性細(xì)胞因子等其他配套試劑試驗獲取。
圖.HUVEC細(xì)胞血管生成結(jié)果圖及血管免疫熒光染色結(jié)果
圖.以HepG2細(xì)胞皮下接種至BALB/c-nu雌性小鼠，飼養(yǎng)1月觀察結(jié)果
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類型 |
貨號 |
產(chǎn)品名稱 |
應(yīng)用方向 |
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基本濃度 8-12 mg/ml |
Ceturegel® Matrix Basic Type ,LDEV-Free基質(zhì)膠 |
適應(yīng)于細(xì)胞培養(yǎng)、貼壁、侵襲和遷移實驗以及細(xì)胞分化等研究 |
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Ceturegel® Matrix LDEV-Free基質(zhì)膠 |
適應(yīng)于2D和3D培養(yǎng)、侵襲和遷移實驗，也可以用于體內(nèi)成瘤實驗 |
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Ceturegel® Matrix Phenol Red-Free，LDEV-Free 基質(zhì)膠 |
主要應(yīng)用于需要顏色檢測如熒光檢測實驗等 |
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高濃度 ≥18mg/ml |
Ceturegel® Matrix High Concentration，LDEV-Free 基質(zhì)膠 |
主要應(yīng)用于如血管生成、凝膠栓塞和體內(nèi)成瘤實驗（對于血管生成建議基質(zhì)膠終濃度要≥10mg/ml） |
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Ceturegel® Matrix High Concentration，GFR，LDEV-Free 基質(zhì)膠 |
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Ceturegel® Matrix High Concentration，Phenol Red-Free，LDEV-Free 基質(zhì)膠 |
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低生長因子 |
Ceturegel® Matrix GFR，LDEV-Free 基質(zhì)膠 |
主要是排除生長因子對實驗的干擾。應(yīng)用于與生長因子、信號通路等相關(guān)研究。無酚紅的也用來做類器官培養(yǎng) |
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Ceturegel® Matrix GFR，Phenol Red-Free，LDEV-Free 基質(zhì)膠 |
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干細(xì)胞用 |
Ceturegel® Matrix hESC-Qualified，LDEV-Free 基質(zhì)膠 |
主要用于如hESC，iPSC等干細(xì)胞培養(yǎng) |
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類器官用 |
Ceturegel® Matrix for Organoid culture，Phenol Red-Free，LDEV-Free 基質(zhì)膠 |
類器官培養(yǎng)專用基質(zhì)膠 |
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鼠尾膠原 |
Collagen, Type I , from rat tail 鼠尾膠原蛋白I（大鼠源） |
侵襲和遷移。培養(yǎng)或分化研究 |
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Cebrary® Collagen, Type I , from mouse tail 鼠尾膠原蛋白I型（小鼠源） |
侵襲和遷移。培養(yǎng)或分化研究 |
Wnt3a類器官培養(yǎng)案例結(jié)果
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蛋白名稱 |
種屬 |
貨號 |
規(guī)格 |
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Wnt3a |
Human |
100/500 ug |
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R-Spondin 1
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Human |
100/500 ug |
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Mouse |
100/500 ug |
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Noggin
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Human |
100/500 ug |
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Mouse |
100/500 ug |
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EGF
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Human |
100/500 ug |
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Mouse |
100/500 ug |
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FGF-2
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Human |
100/500 ug |
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Mouse |
100/500 ug |
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FGF-4 |
Human |
100/500 ug |
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FGF-7
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Human |
100/500 ug |
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Mouse |
100/500 ug |
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FGF-9
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Human |
100/500 ug |
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Mouse |
100/500 ug |
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FGF-10
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Human |
100/500 ug |
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Mouse |
100/500 ug |
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FGF-19 |
Human |
100/500 ug |
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Activin A |
Human/Mouse/Rat |
100/500 ug |
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BMP-2 |
Human/Mouse/Rat |
100/500 ug |
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BMP-4
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Human |
100/500 ug |
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Mouse |
100/500 ug |
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BMP-7 |
Human |
100/500 ug |
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DKK-1 |
Human |
100/500 ug |
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VEGF165 |
Human |
100/500 ug |
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HGF |
Human |
100/500 ug |
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GDNF
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Human |
100/500 ug |
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Mouse |
100/500 ug |
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IGF-1 |
Human |
100/500 ug |
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Shh
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Human |
100/500 ug |
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Mouse |
100/500 ug |
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BDNF |
Human |
100/500 ug |
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NRG1 |
Human |
100/500 ug |
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SHH
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Human |
100/500 ug |
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Mouse |
100/500 ug |
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應(yīng)用類別 |
產(chǎn)品名稱 |
貨號 |
規(guī)格 |
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小鼠小腸 |
Cebrary® Intestinal Organoid Growth Medium (Mouse) 小鼠腸類器官生長培養(yǎng)基 |
l00/500mL |
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結(jié)腸癌（人） |
Cebrary® Intestinal Cancer Organoid Growth Medium (Human) 腸癌類器官生長培養(yǎng)基 |
l00/500mL |
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胃癌（人） |
Cebrary® Gastric Cancer Organoid Growth Medium (Human) 胃癌類器官生長培養(yǎng)基 |
l00/500mL |
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肝癌（人） |
Cebrary® Liver Cancer Organoid Growth Medium (Human) 肝癌類器官生長培養(yǎng)基 |
l00/500mL |
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乳腺癌（人） |
Cebrary® Breast Cancer Organoid Growth Medium (Human) 乳腺癌類器官生長培養(yǎng)基 |
l00/500mL |
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肺癌（人） |
Cebrary® Lung Cancer Organoid Growth Medium (Human) 肺癌類器官生長培養(yǎng)基 |
l00/500mL |
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食管癌（人） |
Cebrary® Esophageal Cancer Organoid Growth Medium (Human) 食管癌類器官生長培養(yǎng)基 |
l00/500mL |
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卵巢癌（人） |
Cebrary® Ovarian cancer Organoid Growth Medium (Human)卵巢癌類器官生長培養(yǎng)基 |
l00/500mL |
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胰腺癌（人） |
Cebrary® Pancreatic cancer Organoid Growth Medium (Human)胰腺癌類器官生長培養(yǎng)基 |
l00/500mL |
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產(chǎn)品名稱 |
貨號 |
規(guī)格 |
產(chǎn)品名稱 |
貨號 |
規(guī)格 |
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CHIR-99021 |
10 mg |
Wortmannin |
10 mg |
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SB-431542 |
10 mg |
Trichostatin A |
10 mg |
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LDN193189 (DM-3189) |
10 mg |
5-Azacytidine |
10 mg |
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LDN-193189 HCl |
10 mg |
A 83-01 |
10 mg |
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DAPT (GSI-IX,LY-374973) |
10 mg |
Nicotinamid |
10 mg |
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Y-27632 |
10 mg |
AICAR(Acadesine) |
10 mg |
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Y-27632 dihydrochloride |
10 mg |
Cyclopamine |
10 mg |
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LY-411575 (LY411575) |
10 mg |
LY294002 |
10 mg |
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Valproic acid |
10 mg |
Prostaglandin(PG) E2 |
10 mg |
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Repsox |
10 mg |
Sodium Butyrate |
10 mg |
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Purmorphamine |
10 mg |
IDE1 |
10 mg |
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Retinoic acid |
10 mg |
IDE2 |
10 mg |
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Forskolin |
10 mg |
Dorsomorphin dihydrochloride |
10 mg |
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IWR-1 |
10 mg |
SB-202190 |
10 mg |
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SB 203580 |
10 mg |
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產(chǎn)品類別 |
名稱 |
貨號 |
規(guī)格 |
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組織細(xì)胞消化
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Collagenase I 膠原酶I型 |
100mg |
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Collagenase II 膠原酶II型 |
100mg |
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Collagenase III 膠原酶III型 |
100mg |
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Collagenase IV膠原酶IV型 |
100mg |
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Collagenase V膠原酶V型 |
100mg |
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培養(yǎng)添加物
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L-丙氨酰-L-谷氨酰胺，200mM |
100/500 mL |
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B-27無血清添加劑,去除維生素A,50X |
10 mL |
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N-2 supplement,serum free N-2無血清添加劑 |
5 mL |
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L-Glutamine L-谷氨酰胺 |
100g |
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支原體系列
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支原體預(yù)防試劑（2000×） |
1mL |
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支原體去除試劑（1000×） |
1mL |
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GMyc-PCR Mycoplasma Test Kit GMyc-PCR 支原體檢測試劑盒 |
10/20 assays |
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MycAway™ Plus-Color One-Step Mycoplasma Detection Kit 一步法快速支原體檢測試劑盒 |
25/60T |
[1] Kleinman H K , Martin G R . Ceturegel: basement membrane matrix with biological activity.[C]// Seminars in Cancer Biology. 2005.
將Ceturegel®基質(zhì)膠埋整瓶沒在碎冰盒中，再將冰盒置于4℃冰箱中，過夜融化，確保碎冰足量。融化后轉(zhuǎn)動瓶子查看Ceturegel®基質(zhì)膠是否全部融化，確認(rèn)無冰晶或膠塊殘留。我們建議過夜融化，高蛋白濃度的Ceturegel®基質(zhì)膠可能需要更多的時間。請勿將Ceturegel®基質(zhì)膠瓶直接放在4℃冰箱中融化，也請勿將冰盒及Ceturegel®基質(zhì)膠放置在冰箱門上或冰箱靠門的位置。以下圖片可供參考：
標(biāo)準(zhǔn)型Ceturegel®基質(zhì)膠融化后應(yīng)為澄清的液體，無酚紅的為澄清且透明；蛋白濃度越高，融化后液體越粘稠。具體請參考下圖Ceturegel®基質(zhì)膠融化后的照片，左邊兩瓶是高濃度型，右邊兩瓶是標(biāo)準(zhǔn)型：
可將凍融后的Ceturegel®基質(zhì)膠分裝在多個小管，所有分裝均需用預(yù)冷的凍存管，迅速冷凍并保存，避免多次凍融。所有涉及到使用的物品在使用前需預(yù)冷，使用預(yù)冷的移液管、吸頭及小管等操作基質(zhì)膠。
Ceturegel®基質(zhì)膠對溫度非常敏感，超過10℃即開始成膠，超過22℃成膠速度會更快。如果到貨情況正常，出現(xiàn)此種現(xiàn)象應(yīng)該是融化操作不規(guī)范或者融化期間環(huán)境溫度升高導(dǎo)致部分凝膠。請一定嚴(yán)格按照融化操作規(guī)范執(zhí)行，確保融化時保持低溫環(huán)境。
一般可用預(yù)冷的無血清培養(yǎng)基或pH7.4的PBS稀釋。由于批次之間的濃度差異，推薦按照特定的工作終濃度稀釋，而不要以比例或稀釋倍數(shù)稀釋。
所有接觸Ceturegel®的試劑耗材產(chǎn)品都需要預(yù)冷，操作過程應(yīng)全程在冰上操作，確保低溫環(huán)境。Ceturegel®對溫度十分敏感，一旦超過10℃，即開始凝膠。
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離心：收到的管子內(nèi)為凍干粉，開蓋前要快速離心10000-12000rpm，30s，以便使可能脫落粘附在管蓋或管壁上的蛋白聚集于管底。
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溶解：用說明書上指定溶液進(jìn)行溶解，溶解濃度控制在 0.1-1.0 mg/mL。注意：不要用渦旋振蕩儀劇烈渦旋，劇烈震蕩會造成蛋白失活 可以用槍頭輕輕吹打幾次助溶，或者室溫靜置一段時間。
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稀釋：稀釋可用PBS或者基礎(chǔ)培養(yǎng)基溶液，其中需含有0.1%BSA或者10%FBS或者5%海藻糖備用(確保無菌)，使用以上三種稀釋液的任意一種稀釋重懸的蛋白溶液，稀釋濃度根據(jù)您的使用濃度確定，不要低于10ug/ml。即可分裝成小管，凍存在-20—80℃。
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使用：使用時取用一支凍存的細(xì)胞因子，加入到您的培養(yǎng)基中至使用濃度。細(xì)胞因子應(yīng)避免反復(fù)凍融。
客戶使用引用文獻(xiàn)-基質(zhì)膠
【1】Wang Z, Wang Q, Chen C, Zhao X, Wang H, Xu L, Fu Y, Huang G, Li M, Xu J, Zhang Q, Wang B, Xu G, Wang L, Zou X, Wang S. NNMT enriches for AQP5+ cancer stem cells to drive malignant progression in early gastric cardia adenocarcinoma. Gut. 2023 Mar 28:gutjnl-2022-328408. doi: 10.1136/gutjnl-2022-328408. Epub ahead of print. PMID: 36977555. IF31.793
【2】Luo K, Gao Y, Yin S, Yao Y, Yu H, Wang G, Li J. Co-delivery of paclitaxel and STAT3 siRNA by a multifunctional nanocomplex for targeted treatment of metastatic breast cancer. Acta Biomater. 2021 Oct 15;134:649-663. doi: 10.1016/j.actbio.2021.07.029. Epub 2021 Jul 18. PMID: 34289420. IF19.92
【3】Zhao Y, Lu T, Song Y, Wen Y, Deng Z, Fan J, Zhao M, Zhao R, Luo Y, Xie J, Hu B, Sun H, Wang Y, He S, Gong Y, Cheng J, Liu X, Yu L, Li J, Li C, Shi Y, Huang Q. Cancer Cells Enter an Adaptive Persistence to Survive Radiotherapy and Repopulate Tumor. Adv Sci (Weinh). 2023 Mar;10(8):e2204177. doi: 10.1002/advs.202204177. Epub 2023 Jan 19. PMID: 36658726; PMCID: PMC10015890. IF9.0
